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細胞名稱 小鼠骨髓纖維原細胞;M2-10B4
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是CJ Eaves從(C57BL/6JX C3H/HeJ)F1小鼠的骨髓基質中分離建立的。M2-10B4表達層粘連蛋白和膠原蛋白IV,但并不表達膠原蛋白I。在長期培養體系中該細胞支持人或鼠的骨髓組織生成。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
產品圖片:
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
300mg
65-49-6 對氨水楊酸標準品 Aminosalicylic Acid 125mg
3119-15-1 3-氨基-2,4,6-三品 苯甲酸標準品 50mg
2280-89-9 "
5-氨基-3-羧基-2,4,6-三品 -N-甲基苯甲酰胺標準品
" 50mg
19774-82-4 鹽酸胺品 酮標準品 Amiodarone Hydrochloride 200mg
51-26-4 胺品 酮相關物質D標準品 Amiodarone Related Compound D 20mg
Amiodarone R... 胺品 酮相關物質E標準品 Amiodarone Related Compound E 25mg
869-24-9 胺品 酮相關物質H標準品 Amiodarone Related Compound H 20mg
33089-61-1 雙甲瞇標準品 Amitraz 200mg
549-18-8 鹽酸阿米替林標準品 Amitriptyline Hydrochloride 200mg
1210-35-1 阿米替林相關物質A標準品 30mg
1159-03-1 阿米替林相關物質B標準品 25mg
111470-99-6 苯磺酸氨氯地平標準品 Amlodipine Besylate 350mg
113994-41-5 氨氯地平相關物質A標準品 25mg
33434-24-1 季胺基甲基丙烯酸酯共聚物A型標準品 100mg
33434-24-1 季胺基甲基丙烯酸酯共聚物B型標準品 100mg
8000-73-5 碳酸銨標準品 Ammonium Carbonate (AS) 2g
12125-02-9 氯化銨標準品 Ammonium Chloride 200mg
7783-28-0 磷酸氫二銨標準品 1g
57-43-2 異戊巴比妥CII標準品 Amobarbital CII 200mg
6398-98-7 阿莫地喹鹽酸鹽標準品 Amodiaquine Hydrochloride 500mg
14028-44-5 阿莫沙平標準品 Amoxapine 200mg
61336-70-7 阿莫西林標準品 Amoxicillin
mmp-2(Human) 基質金屬蛋白酶-2(人)
ILK-1(Human) 人整合素連接激酶1
Human complement factor H,CFH 人自身免疫類ELISA試劑盒
G-CSF 人粒細胞-集落刺激因子
NO(Nitric Oxide )human 一氧化氮(人)
GM-CSF 人粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子
M-CSF 人巨噬細胞-集落刺激因子
LIF 人白血病抑制因子
Lysozyme(human) 溶菌酶(人)
IGF-1 人胰島素樣生長因子-1
IGF- II 人胰島素樣生長因子-Ⅱ
ICAM- I 人細胞間粘附因子-Ⅰ
VCAM-1 人血管內皮細胞間粘附因子-1
VEGFR2/VEGF-R2/Flk1(human) 血管內皮生長因子受體2
L-selectin 人可溶性L-選擇素
E-selectin 人可溶性E-選擇素
P-selectin 人可溶性P-選擇素
COX-2(human) 人前列腺素氧化環化酶2
PDGF-AB 人血小板衍生生長因子
PDGF-BB 人血小板衍生生長因子-BB
PGE1 人前列腺素1
PGE2 人前列腺素2
P53 人P53蛋白
Osteocalcin 人骨鈣素
Oxytoxin 人催產素
小鼠骨髓纖維原細胞;M2-10B4UPAR 人凝血酶受體
progesterone 人孕酮
prolactin 人催乳素
Substance P 人P物質
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。
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