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細胞名稱 雜交瘤細胞;S-71-9
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
產品圖片:
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
培養基 100
培養基原材料,提供細菌生長氮源,含色氨酸 Tryptone 胰蛋白胨 250
干酪素胰酶水解而成,培養基原材料 Peptone from Casein 酪蛋白胨 250
培養基原材料,提供細菌生長所需的生長因子 Beef Extract Powder 牛肉浸粉 250
培養基原材料,提供細菌生長所需的維生素B族 Yeast Extract Powder 酵母浸粉 250
培養基原材料,培養基凝固劑 Agar Bacteriological 細菌瓊脂粉 250
培養基原材料,含碳水化合物,提供細菌生長氮源 Peptone from Soybean Meal 植物(大豆)蛋白胨 200
培養基原材料,提供細菌生長所需的生長因子 Peptone Bacteriological 細菌蛋白胨 250
培養基原材料,為營養要求高的細菌生長提供營養 Proteose peptone 月示胨 250
用于抑制革蘭氏陽性菌的生長 No. 3 Bile Salt 三號膽鹽 100
培養基原材料,提供豐富的營養成份 Beef Heart Infusion 牛心浸粉 100
培養基原材料,為營養要求高的細菌提供生長營養成份 Liver Infusion 肝浸粉 100
500克 Wheat gern powder 小麥胚芽粉 BR
250克 Malt extract 麥芽浸粉 BR
100克 Malt extract 麥芽浸汁 BR
250克 Nonfat-Dried Milk 無脂肪奶粉 蛋白組級
250克 Serum powder 血清消化粉 BR
250克 全胃浸粉 全胃浸粉 BR
250克 Liver extract powder(Beef) 牛肝浸粉 BR
250克 Brain infusion powder 牛腦浸粉 BR
1vail HAT Media Supplement (50×) Hybri-Max™ HAT混合鹽 γ射線滅菌
10vail
1vail HT Media Supplement (50×) H
l/瓶 用于細菌總數測定,24h 內出結果, 細菌呈紅色
1 萬 ml/瓶
TBX 顯色培養基 1000ml/瓶 用于大腸桿菌快速檢測,24h 內出 結果,大腸桿菌顯藍色
5000ml/瓶
大腸桿菌/大腸菌群顯色培養基 1000ml/瓶 用于同時快速檢測大腸桿菌、大腸 菌群,24h 內出結果,大腸桿菌藍 紫色,大腸菌群橙紅色
5000ml/瓶
大腸菌群顯色培養基 1000ml/瓶 用于大腸菌群快速檢測,24h 內出 結果,大腸菌群顯藍色
5000ml/瓶
沙門氏菌顯色培養基 1000ml/瓶 用于沙門氏菌快速檢測,24h 內出 結果,沙門氏菌顯紫紅色
5000ml/瓶
李斯特氏菌顯色培養基 1000ml/瓶 用于李斯特氏菌快速檢測,48h 內 出結果,李斯特氏菌顯藍色有不透 明暈環
5000ml/瓶
弧菌顯色培養基 1000ml/瓶 用于弧菌快速檢測,副溶血性弧菌 顯藍色,霍亂弧菌顯紅色
5000ml/瓶
金黃色葡萄球菌顯色培養基 1000ml/瓶 用于金黃色葡萄球菌快速檢測, 24h 內出結果,金黃色葡萄球菌顯 藍色
雜交瘤細胞;S-71-95000ml/瓶
念珠菌顯色培養基 1000ml/瓶 用于念珠菌快速檢測,48~72h 內出 結果,白色念珠菌顯綠色,克柔氏 念珠菌顯粉紫色
5000ml/瓶
大腸埃希氏菌 O157 顯色培養基 1000
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。
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