細胞名稱 病毒轉化的人B淋巴細胞；KMY0919

形態特性 淋巴母細胞樣

生長特性 懸浮生長

特征特性 該細胞系來源于一重度少精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。

培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

傳代方法 1:2傳代；5-6天一次

傳代情況 P2

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 熒光法（-）

STR -

同工酶

染色體

產品圖片：

細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎 規格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養（GB標準） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格:  250g 作用：  用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗，還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養基，用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格:  250g 作用：  可廣泛應用于細菌的培養，特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

"香蘭素 " Vanillin "≥98% "

"香葉木素 " Diosmetin "≥98% "

小白菊內酯 Parthenolide ≥97%

"辛可尼丁 " Cinchonidine "≥98% "

"辛可寧 " Cinchonine "≥98% "

新橙皮苷 Neohesperidin "≥98% "

新橙皮苷二氫查爾酮 Neosperidin dihydrochalcone "≥98% "

新穿心蓮內酯 Neoandrographolide 97%

新綠原酸/5-咖啡酰奎寧酸 5-Dicaffeoylquinic acid "≥97% "

新芒果苷 Neomangiferin "≥98% "

雄烯二酮 Androstenedione "≥98% "

熊果苷 Arbutin "≥98% "

雪膽素甲 Hemslecin A "≥97% "

雪上一枝蒿乙素 Bullatine B "≥98% "

血根堿 Sanguinarine "≥97% "

"亞麻木酚素(SDG) " Lignans ≥97%

延齡草苷 Trillin "≥98% "

鹽酸黃連堿 Coptisine hydrochloride "≥97% "

鹽酸去氫駱駝蓬堿 Harmine. hydrochloride "≥98% "

鹽酸石蒜堿 Lycorine hydrochloride "≥98% "

"鹽酸水蘇堿 " Stachydrine hydrochloride "≥98% "

鹽酸拓撲替康 Topotecan hydrochloride ≥98%

鹽酸小檗胺 Berbamine Hydrochloride ≥98%

鹽酸依立替康 Irrotecan hydrochloride ≥99%

鹽酸育亨賓 Yohimbine hydrochloride "≥98% "

楊梅素 Myricetin "≥98% "

A-375 [A375](惡性黑色素瘤細胞) CRL-1619

A-431(表皮癌細胞) CRL-1555

A549 [A-549](肺癌細胞) CCL-185

A-673(橫紋肌瘤細胞) CRL-1598

A9(皮下結締組織細胞) CRL-1811

AAV-293( 胚腎細胞 ) //

Acc-2(涎腺腺樣囊性癌細胞) //

THP-1(單核細胞白血病) TIB-202

TT(人甲狀腺癌細胞) CRL-1803

U-2 OS(骨肉瘤細胞) HTB-96

U251(膠質瘤細胞) //

U-937(組織細胞淋巴瘤細胞) CRL-1593.2

V79-4(中國倉鼠肺細胞) CCL-93

病毒轉化的人B淋巴細胞；KMY0919VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細胞) CRL-1586

Vero(非洲綠猴腎細胞) CCL-81

WEHI 22.1(B淋巴細胞 ) TIB-54

WI-38(胚肺細胞) CCL-75

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富，可提高轉化效率)。
4. 37℃，225 rpm復蘇60分鐘或30℃，225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時，30℃培養可降低錯誤重組的概率，若轉化control pUC19計算轉化效率，則需37℃，225 rpm復蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。