細(xì)胞名稱 兔腎細(xì)胞；RK13

形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 RK13細(xì)胞初期建系于1959年，衍生于5周齡兔的胰酶消化腎細(xì)胞。該細(xì)胞系對風(fēng)疹病毒(Rubella virus)敏感，病毒感染產(chǎn)生致細(xì)胞病變(CPE)。研究發(fā)現(xiàn)RK13細(xì)胞可作為多種病毒的敏感宿主，支持B病毒、單純皰疹病毒(Herpes simplex virus)、偽狂犬病毒(Pseudorabies virus)、痘苗病毒(Vaccinia virus)、兔痘病毒(Rabbitpox virus)、粘液瘤病毒(Myxoma virus)和猴腺病毒(Simian adenoviruses)的增殖。另外

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS

傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況 C186

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 陰性

STR STR鑒定

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗，還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

100mg

154-41-6 鹽酸苯丙醇胺標(biāo)準(zhǔn)品 250mg

118-55-8 柳酸苯酯熔點標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)品 500mg

1176-08-5 檸檬酸苯托沙敏標(biāo)準(zhǔn)品 Phenyltoloxamine Citrate 100mg

苯托沙敏相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

57-41-0 苯妥英標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

3060-50-2 苯妥英相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Phenytoin Related Compound A 50mg

6802-95-5 苯妥英相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

630-93-3 苯妥英鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Phenytoin Sodium 200mg

6184-17-4 核黃素磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Phosphated Riboflavin 100mg

8002-43-5 卵磷脂標(biāo)準(zhǔn)品 350mg

39382-08-6 磷酯酰乙醇胺標(biāo)準(zhǔn)品 100mg

7664-38-2 磷酸標(biāo)準(zhǔn)品 Phosphoric Acid (AS) 1.5ml×3ampules

牛無細(xì)胞真皮基質(zhì)參考顯微照片標(biāo)準(zhǔn)品 ea

馴養(yǎng)老鼠嗜鉻細(xì)胞瘤參考照片標(biāo)準(zhǔn)品 ea

可移植皮參考顯微照片標(biāo)準(zhǔn)品 ea

" 

人類成纖維細(xì)胞源性皮膚替代參考顯微照片標(biāo)準(zhǔn)品 

" ea

人皮膚參考顯微照片標(biāo)準(zhǔn)品 ea

57-64-7 水楊酸毒扁豆堿標(biāo)準(zhǔn)品 Physostigmine Salicylate 200mg

84-80-0 維生素K1標(biāo)準(zhǔn)品 Phytonadione (Vitamin K1) 500mg

92-13-7 毛果蕓香堿標(biāo)準(zhǔn)品 Pilocarpine 300mg

54-71-7 鹽酸毛果蕓香堿標(biāo)準(zhǔn)品 Pilocarpine Hydrochloride 200mg

2062-78-4 哌咪清標(biāo)準(zhǔn)品

complex II ,MHC II /HLA- II ELISA Kit  人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類

Human apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit  人載脂蛋白A1

Human apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit  人載脂蛋白B100

Human leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit   人白血病抑制因子受體

Human Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit   人免疫球蛋白A

Human Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit   人免疫球蛋白G

Human Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit   人免疫球蛋白M

Human plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit   人纖溶酶原激活物抑制因子1

Human plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit   人纖溶酶原激活物抑制因子

Human Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit   人血纖蛋白原降解產(chǎn)物

Human thrombomodulin,TM ELISA Kit   人血栓調(diào)節(jié)蛋白

Human platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit   人血小板衍生生長因子

Human platelet activating factor,PAF ELISA Kit   人血小板活化因子

Human Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit  人組織型纖溶酶原激活劑

Human Tissue factor,IF ELISA Kit  人組織因子

Human Beta-Thromboglobulin, Beta-TG ELISA Kit  人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白

Human Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit  人血小板因子4

Human lymphocyte function associated antigen 2,LFA-2 ELISA Kit  人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2

兔腎細(xì)胞；RK13Human leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit   人白三烯E4

Human D-Dimer,D2D ELISA Kit  人D二聚體

human Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit   人免疫球蛋白E

Human Triggering Receptor Expresses o

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。