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以下是反芻獸考德里氏體PCR檢測試劑盒的訂購信息:
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
1-甲基-2-咪唑啉酮 694-32-6
2-溴-2,4-二甲氧基苯乙酮 60965-26-6
2-溴戊酸乙酯 615-83-8
619-26-1
2-溴-N-環己基乙酰胺 63177-66-2
1-溴-3-苯基丙烷 637-59-2
DL-氨基己內酰胺 671-42-1
3-氨基戊烷 616-24-0
4-硝基苯磺酰胺 6325-93-5
5-溴-2-甲氧基 6358-77-6
3-乙氧基丙烯腈 61310-53-0
4-苯氧基苯乙酸 6328-74-1
3-(4-溴苯甲酰)丙酸 6340-79-0
2-氨基戊烷 63493-28-7
6-溴己腈 6621-59-6
苯并惡唑胺 61-80-3
3-己醇 623-37-0
4-溴-N,N-二甲基芐胺 6274-57-3
1,4:3,6-雙脫水甘露醇 641-74-7
2-氯-6-甲基芐腈 6575-9-3
4-甲基-3-三氟甲基 65934-74-9
6-BROMO-3-METHYLBENZO[D]ISOXAZOLE 66033-69-0
2,3-二氟-6-硝基苯甲醚 66684-60-4
2,6-二羥基嘌呤 69-89-6
對氰基苯甲酰氯 6068-72-0
N-甲基-2-硝基612-28-2
2-甲基-5-苯并噻唑 68867-14-1
4-異丙基吡啶 696-30-0
N-甲基-N-(4-吡啶甲基)胺 6971-44-4
6-氯-1,3-二甲基脲嘧啶 6972-27-6
2-呋喃基乙酮,99% 6975-60-6
5-硝基乳清酸鉀鹽單水合物 60779-49-9
3-羥基丙酸甲酯 6149-41-3
3-氟丫丁啶鹽酸鹽 617718-46-4
3-乙氧基苯酚 621-34-1
1,4-苯二乙腈 622-75-3
3-氰基苯丙氨酸 63999-80-4
反芻獸考德里氏體PCR檢測試劑盒咪唑并[1,2-A!吡啶-2-羧酸 64951-08-2
2,4-二甲基-6-羥基嘧啶 6622-92-0
2-氨基-1-甲基咪唑 6646-51-1
5-氯-1H-吲唑 698-26-0
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
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