細(xì)胞簡介：

小鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮分離自臍帶組織；它是臍動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)，臍帶中通過尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)試劑盒 ，英文名： MMP2 ELISA Kit

Mouse histamine (HIS) ELISA Kit 小鼠組胺(HIS)試劑盒

RatBladdeumoraigen,BTAELISAKit 大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforFAELISAKit大鼠

細(xì)胞膠原蛋白(collagen)比色法定量試劑盒20次

Ratmyeloperoxidase,MPOELISAKit大鼠髓過氧化物酶(MPO)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠α半乳糖基抗體(Gal)試劑盒

小鼠αN已酰基葡糖苷酶(αNAG)試劑盒

小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒

小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)試劑盒

軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體

BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體

TIMD4重組小鼠 TIM4 / TIMD4 蛋白 Protein

Caspase-6 (CT 0.5mgCaspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)

FAM3B重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

FABP3 Protein Human 重組人 FABP3 / H-FABP / M-FABP 蛋白

CSF1R Protein Rat 重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白

Caspase-6 (CT 0.5mgCaspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)

FABP3 Protein Human 重組人 FABP3 / H-FABP / M-FABP 蛋白

TIMD4重組小鼠 TIM4 / TIMD4 蛋白 Protein

CSF1R Protein Rat 重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白

FAM3B重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA pcr檢測試劑盒

Human adrenergic receptor a1A (ADRA1A) ELISA Kit 人能a1A受體(ADRA1A)試劑盒

humanProstaglandinF,PG-FELISAKit 人前列腺素F(PGF)pcr檢測試劑盒分裝

Humanai-perinuclearfactor,APF試劑盒人抗核周因子抗體(APF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細(xì)胞可溶性總蛋白制備試劑盒20次

Humayrosinehydroxylase,THELISAKit人酪羥化酶(TH)試劑盒規(guī)格：96T/48T