小鼠食管平滑肌細胞

| 商品屬性：

| 細胞介紹：

小鼠食管平滑肌分離自食管組織；食管可分為頸段、胸段和腹段，脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，肌層上1/3段為骨骼肌，下1/3為平滑肌，中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中，肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動是由食管平滑肌收縮嚴格控制，食管還有括約肌，位于環(huán)狀軟骨水平的，稱為食管上括約肌；位于食管下端，一部分在膈上，穿過膈孔，另一部分在膈下的高壓帶，稱為食管下括約肌。食管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

| 方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠食管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠食管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

| 培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

| 細胞培養(yǎng)操作：

1）復蘇細胞：將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 公司正在出售的產(chǎn)品

大鼠血小板激活因子(PAF)試劑盒 ，英文名： PAF ELISA Kit

Mouse calf iestinal alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒

MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAkit 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumancoagulationfactorII,FIIELISAKit人Ⅱ

細胞CDK6/CYCD1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitCAM大鼠鈣調(diào)素

兔子免疫球蛋白G試劑盒   兔子免疫球蛋白G試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子免疫球蛋白G試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子免疫球蛋白G試劑盒、兔子免疫球蛋白G 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔子免疫球蛋白E試劑盒   兔子免疫球蛋白E試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子免疫球蛋白E試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子免疫球蛋白E試劑盒、兔子免疫球蛋白E 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔子免疫球蛋白A試劑盒   兔子免疫球蛋白A試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子免疫球蛋白A試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子免疫球蛋白A試劑盒、兔子免疫球蛋白A 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔子可溶性CD40配體試劑盒   兔子可溶性CD40配體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子可溶性CD40配體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

皮質(zhì)胸腺細胞樣蛋白VSIG2抗體

小鼠白介素35(IL-35)試劑盒 96T/48T

Rat heat shock factor 1 (HSF1) ELISA Kit 大鼠熱休克因子1(HSF1)試劑盒

Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit 人酪激酶2(Tyk-2)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCalretinin,CR試劑盒人鈣結(jié)合蛋白(CR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達細胞克隆凍存試劑盒50次

Humansolubleierleukin-1receptorⅠ，IL-1sRⅠELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬霍亂沙門氏菌抗體

SDF2重組人 SDF2 蛋白 Protein

血小板生成素(TPO)重組蛋白 Recombinant Thrombopoietin (TPO)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

GFPT1 Protein Human 重組人 GFPT1 / GFAT 蛋白

B18R Protein Vaccinia Virus 重組牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白

小鼠食管平滑肌細胞血小板生成素(TPO)重組蛋白 Recombinant Thrombopoietin (TPO)

GFPT1 Protein Human 重組人 GFPT1 / GFAT 蛋白

SDF2重組人 SDF2 蛋白 Protein

B18R Protein Vaccinia Virus 重組牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

| 注意事項：

1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導致細胞出現(xiàn)問 題，責任由客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細胞僅供科研使用