細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠前列腺上皮分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成對(duì)的實(shí)質(zhì)性器宮，由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過(guò)，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問(wèn)題時(shí)，排尿首先受影響。前列腺是機(jī)體非常少有的，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構(gòu)成精液主要成分；作為內(nèi)分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。前列腺上皮細(xì)胞與前列腺的功能關(guān)系密切，上皮細(xì)胞的損傷是前列腺炎的主要病癥，重度的前列腺炎患者的前列腺液內(nèi)可檢測(cè)到脫落的上皮細(xì)胞，這是上皮細(xì)胞損傷的標(biāo)志。炎癥發(fā)生時(shí)，與炎癥相關(guān)的一些炎癥因子可能發(fā)生變化。因此，體外培養(yǎng)前列腺上皮細(xì)胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基礎(chǔ)。前列腺主要特征如下：①前列腺結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)均受雄性激素的調(diào)控；②基底細(xì)胞主要表達(dá)高分子量細(xì)胞角蛋白（CK-5、CK-14），基底上皮細(xì)胞可分化成管腔上皮細(xì)胞；③前列腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)為研究前列腺的許多重要特性以及化學(xué)和激素性致癌作用提供了機(jī)會(huì)。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠前列腺上皮采用先消化、后膠原酶-聯(lián)合消化并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠前列腺上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠巨細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)試劑盒 ，英文名： GM-CSF ELISA Kit

Mouse connective tissue growth factor (CTGF) ELISA Kit 小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)試劑盒

Mousecalciumchannelblockers,CCBELISAKit 小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanparamyxovirusparotitisIgMELISAKit人腮腺病毒IgM

同位素標(biāo)記法組織端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10次

ELISAKitpACCase大鼠0酸化乙酰羧化酶

兔組織因子途徑抑制物(TFPI)試劑盒   96T/48T

兔子組織因子(TF)試劑盒   96T/48T

兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒   96T/48T

兔子組織多肽抗原(TPA)試劑盒   96T/48T

胞漿-5´-核苷酸酶-Ⅱ抗體

小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human glucocoicoid receptor beta (GR- beta) ELISA Kit 人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)試劑盒

HumanApolipoproteinE,Apo-EELISAKit 人載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBladdeumoraigen,BTA試劑盒人膀胱抗原(BTA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物總氨基酸含量熒光定量試劑盒20次

HumansubstancePreceptor,SP-RELISAKit人P物質(zhì)受體(SP-R)試劑盒規(guī)格：96T/48T

麥芽糖孔蛋白抗體

AMY2A重組食蟹猴 AMY2A / Alpha-amylase 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL-12(Interleukin-12 0.5mgIL-12(Interleukin-12) 白介素12抗原(白細(xì)胞介素-12)

S100A14重組人 S100A14 / S114 蛋白 Protein

FSTL5 Protein Human 重組人 FSTL5 蛋白

IFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

小鼠前列腺上皮細(xì)胞IL-12(Interleukin-12 0.5mgIL-12(Interleukin-12) 白介素12抗原(白細(xì)胞介素-12)

FSTL5 Protein Human 重組人 FSTL5 蛋白

AMY2A重組食蟹猴 AMY2A / Alpha-amylase 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

S100A14重組人 S100A14 / S114 蛋白 Protein

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取