細(xì)胞簡介：

小鼠浦肯野分離自小腦皮質(zhì)組織；小腦的表面被覆著一層灰質(zhì)，叫小腦皮質(zhì)，小腦皮質(zhì)分為3層，從表及里分別為分子層、浦肯野細(xì)胞層和顆粒細(xì)胞層。皮質(zhì)里含有星狀細(xì)胞、籃狀細(xì)胞、浦肯野細(xì)胞、高爾基細(xì)胞和顆粒細(xì)胞等5種神經(jīng)元。浦肯野細(xì)胞發(fā)出的軸突組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維，終止于小腦白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)核。浦肯野細(xì)胞（Purkinje cell）是從小腦皮質(zhì)發(fā)出的能夠傳出沖動的神經(jīng)元。人的小腦皮質(zhì)約有1500萬個浦肯野細(xì)胞。浦肯野細(xì)胞還廣泛分布于心室。顯著的電生理特點(diǎn)是傳導(dǎo)性強(qiáng)，傳導(dǎo)速度快，可達(dá)4000mm/s。屬快反應(yīng)自律型細(xì)胞，具有舒張期自動除極化的性能，因而有自律性，但自律性強(qiáng)度明顯低于竇房結(jié)P細(xì)胞。這類細(xì)胞常常平行排列，細(xì)胞內(nèi)電阻低，只有心室細(xì)胞的1/3。小腦：浦肯野細(xì)胞是小腦皮質(zhì)中大的神經(jīng)元，細(xì)胞體呈梨形，頂端發(fā)出2~3條粗大的主樹突，向外伸入分子層。主樹突沿途分支繁茂，形如展開的、扁薄的扇形，鋪展在與小腦葉片長軸垂直的平面上。樹突分支上有大量的樹突棘，與傳入纖維構(gòu)成廣泛的突觸聯(lián)系，接受傳入小腦的全部信息。軸突由細(xì)胞底部（與主樹突相對方向）發(fā)出，細(xì)長，離開胞體不遠(yuǎn)便形成有髓神經(jīng)纖維，向內(nèi)經(jīng)顆粒層離開皮質(zhì)進(jìn)入白質(zhì)，組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維，終止于小腦內(nèi)部的神經(jīng)核團(tuán)。一個浦肯野細(xì)胞的軸突約形成500個終末膨大，約與小腦深部核團(tuán)的35個神經(jīng)元形成突觸。心臟浦肯野細(xì)胞常常平行排列，幾個細(xì)胞互相以漿膜連接排成一個小束，小束外包繞著基底膜。細(xì)胞內(nèi)含肌原纖維很少，胞漿區(qū)內(nèi)充滿糖原顆粒、線粒體和肌漿網(wǎng)，細(xì)胞內(nèi)電阻低，只有心室細(xì)胞的1/3。浦肯野細(xì)胞內(nèi)無橫管系統(tǒng)，但膜電容比收縮細(xì)胞大，可能是由于其閏盤結(jié)構(gòu)廣泛而復(fù)雜，提供了較大的表面積的緣故。浦肯野細(xì)胞閏盤的主要成分是縫隙連接，粒著膜占的比例很少，這些可能是構(gòu)成浦肯野細(xì)胞傳導(dǎo)快的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠浦肯野采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠浦肯野經(jīng)Neph3免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含脂質(zhì)濃縮液、BSA、Monothioglycerol、Transferrin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒 ，英文名： NSE ELISA Kit

Mouse cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit 小鼠(Cyt-C)試劑盒

RatThromboxaneB2,TXB2ELISAKit 大鼠血栓素B2(TXB2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHBsAb乙型肝表面抗體

細(xì)胞氨含量光譜法定量試劑盒20次

SheepIerleukin1,IL-1ELISAKit綿羊白介素1(IL-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)試劑盒   96T/48T

豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒   96T/48T

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒   96T/48T

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒   96T/48T

轉(zhuǎn)錄因子LBX1抗體

小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat coisol (Coisol) ELISA Kit 大鼠(Coisol)試劑盒

Human15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKit 人15脂加氧酶(15-LO/LOX)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humanB-cellleukemia/lymphoma3,Bcl3試劑盒人B細(xì)胞淋巴瘤因子3(Bcl3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物種子高質(zhì)化葉綠體分離試劑盒10次

Humaelomerase，TEELISAKit人端粒酶(TE)試劑盒規(guī)格：96T/48T

白細(xì)胞介素增強(qiáng)子結(jié)合因子3抗體

IFNA2重組小鼠 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

白細(xì)胞激活黏附因子(ALCAM)重組蛋白 Recombinant Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM)

PDGFRB重組人 PDGFRB / PDGFR-1 / CD140b 蛋白 Protein

FLRT2 Protein Human 重組人 FLRT2 蛋白

IFNA2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白

小鼠浦肯野細(xì)胞Annexin Ⅲ peptide 膜粘連蛋白A3抗體 0.5mgAnnexin Ⅲ peptide 膜粘連蛋白A3抗體

FLRT2 Protein Human 重組人 FLRT2 蛋白

GPA33重組小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 蛋白 Protein

C Protein Rat 重組大鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白

KDR重組人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein