細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞簡介：

小鼠口腔上皮分離自口腔黏膜組織；口腔上皮細(xì)胞是一種上皮細(xì)胞，呈扁平、多邊形，形狀不規(guī)則。口腔各壁都有黏膜覆蓋，口腔上皮細(xì)胞主要分布在口腔兩側(cè)頰部。上皮的垂直切面上，細(xì)胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細(xì)胞為矮柱狀，為具有增殖分化能力的干細(xì)胞，部分子細(xì)胞向淺層移動。基底層以上是數(shù)層多邊形細(xì)胞，再上為幾層梭形或扁平細(xì)胞。僅靠近表面幾層細(xì)胞為扁平狀，基底層細(xì)胞能不斷分裂增生，以補充表層衰老或損傷脫落的細(xì)胞。復(fù)層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的毛細(xì)血管，有利于復(fù)層扁平上皮的營養(yǎng)。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠口腔上皮先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠口腔上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠糖蛋白A33(GPA33)試劑盒 ，英文名： GPA33 ELISA Kit

Mouse glucoprotein 130 (gp130) ELISA Kit 小鼠糖蛋白130(gp130)試劑盒

RatEsadiol,E2ELISAKit 大鼠雌二醇(E2)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHLE(Humanleukocyteexastase)ELISAKit人白細(xì)胞彈性蛋白酶

細(xì)胞PKC激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitCNP大鼠C型尿肽

小鼠5羥色胺試劑盒   小鼠5羥色胺試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠5羥色胺試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠5羥色胺試劑盒、小鼠5羥色胺eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠5核苷酸酶試劑盒   小鼠5核苷酸酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠5核苷酸酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠5核苷酸酶試劑盒、小鼠5核苷酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠25羥基試劑盒   小鼠25羥基試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠25羥基試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠25羥基試劑盒、小鼠25羥基eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒   小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體

小鼠肝病毒(MHV)試劑盒

Human dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 人雙氫(DHT)試劑盒

Humansolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit 人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanai-toxoplasmaIgGaibody,ai-toxIgG試劑盒人抗弓形體IgM抗體(ai-toxIgM)試劑盒

植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法測定試劑盒(單線態(tài)氧氣)20次

Humanansferrieceptor，TFRELISAKit人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)試劑盒

PECI蛋白抗體

YWHAB重組食蟹猴 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 Protein

MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7 0.5mgMMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7) 基質(zhì)金屬蛋白酶-7(抗原)

MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標(biāo)簽)

ESM1 Protein Mouse 重組小鼠 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠口腔上皮細(xì)胞MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7 0.5mgMMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7) 基質(zhì)金屬蛋白酶-7(抗原)

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標(biāo)簽)

YWHAB重組食蟹猴 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 Protein

ESM1 Protein Mouse 重組小鼠 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取