細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

小鼠骨髓來源內皮祖分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內皮祖細胞是血管內皮細胞的前體細胞，亦稱為成血管細胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能進一步增殖分化的幼稚內皮細胞，缺乏成熟內皮細胞的特征性表型，不能形成管腔樣結構，其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發生和血管損傷后的修復。研究顯示，內皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創傷愈合等方面均發揮重要作用，并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路，EPCs生物學特性和治療作用的研究成為這一領域新的熱點。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠骨髓來源內皮祖采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠骨髓來源內皮祖經CD34免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代；不建議多次傳代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產品：

大鼠血管內皮生長因子受體3(VEGFR3)試劑盒 ，英文名： VEGFR3 ELISA Kit

Mouse hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 小鼠輕化1(HYD)試劑盒

Mousemaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISAkit 小鼠基質金屬蛋白酶10(MMP-10)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanBetacatenin,Beta-CatELISAKit人β連環蛋白/聯蛋白

細胞D-乳酸比色法定量試劑盒20次

ELISAKiesistin大鼠抵抗素

小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠上腺素(EPI)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

溶質載體家族25成員35抗體

小鼠核因子kb(NF-kb)試劑盒 96T/48T

Rat ovalbumin specific IgE (OVA sIgE) ELISA Kit 大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)試劑盒

humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMABELISAKIT 人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAi-OvaryAibody,AOAb試劑盒人抗卵巢抗體(AOAb)試劑盒規格：96T/48T

植物高效液相色譜法定量試劑盒20次

Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit人酪激酶2(Tyk-2)試劑盒規格：96T/48T

16號染色體開放閱讀框41抗體

CLEC10A重組小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 標簽) Protein

VGF神經生長因子誘導蛋白(VGF)重組蛋白 Recombinant VGF Nerve Growth Factor Inducible (VGF)

SMPDL3A重組人 SMPDL3A 蛋白 Protein

FABP1 Protein Human 重組人 L-FABP / FABP1 蛋白

IFNG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IFNG / Interferon Gamma 蛋白

小鼠骨髓來源內皮祖細胞C-型凝集素域家族11成員A(CLEC11A)重組蛋白 Recombinant C-Type Lectin Domain Family 11, Member A (CLEC11A)

FABP1 Protein Human 重組人 L-FABP / FABP1 蛋白

DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 Protein

FCGR3A Protein Rat 重組大鼠 CD16a / FCGR3A 蛋白

BPIFA2重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 Protein

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取