細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞簡介：

小鼠骨髓單核分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時(shí)，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細(xì)胞是一種未成熟的單核細(xì)胞，在骨髓細(xì)胞中約占0.04%，被認(rèn)為是破骨細(xì)胞的前體細(xì)胞，較外周血單個(gè)核細(xì)胞誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞得率高、全骨髓誘導(dǎo)法產(chǎn)生的破骨細(xì)胞數(shù)量多，純度高，較脾細(xì)胞誘導(dǎo)法分化效率高。骨髓單核細(xì)胞（BMMNCs）是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細(xì)胞，它屬干細(xì)胞類型。目前，大多數(shù)研究用淋巴分離液分離提取骨髓單核細(xì)胞，近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細(xì)胞。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓單核經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠抑制素βA(INHβA)試劑盒 ，英文名： INHβA ELISA Kit

Mouse immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒

MousePlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAkit 小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforhumandopamine,DAELISAKIT人多巴胺

細(xì)胞ABL1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitEPO大鼠紅細(xì)胞生成素

小鼠β基己糖苷酶試劑盒   小鼠β基己糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠β基己糖苷酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β基己糖苷酶試劑盒、小鼠β基己糖苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒   小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒、小鼠前列腺酸性0酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠糖原合成酶激酶試劑盒   小鼠糖原合成酶激酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠糖原合成酶激酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠糖原合成酶激酶試劑盒、小鼠糖原合成酶激酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠雄烯二試劑盒   小鼠雄烯二試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠雄烯二試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠雄烯二試劑盒、小鼠雄烯二eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

磷酸化卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體

小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒  試劑盒 組裝/原裝

Human neuronal apoptosis inhibitory protein (NAIP) ELISA Kit 人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)試劑盒

humanParathyroidhormone,PTHELISAKit 人甲狀旁腺激素(PTH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAi-nuclearAibody,ANA試劑盒人抗核抗體(ANA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(acidinvease)總活性比色法定量試劑盒20次

HumanulaEsiol，uE3ELISAKit人超敏游離雌三醇(uE3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

核苷酸轉(zhuǎn)氫酶抗體

ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor 0.5mgAh Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烴受體抗原

IZUMO4重組人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白

PVRL1 Protein Rat 重組大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

小鼠骨髓單核細(xì)胞Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor 0.5mgAh Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烴受體抗原

F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白

ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

PVRL1 Protein Rat 重組大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IZUMO4重組人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取