細胞簡介：

小鼠肝星形分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細胞（HSC）又名肝貯脂細胞、A貯存細胞、竇周細胞、Ito細胞等，是肝臟細胞外基質(zhì)的主要來源。HSC在激活后可進一步轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞樣細胞，各種可導(dǎo)致肝纖維化的因素均將HSC作為終靶細胞。正常情況下，HSC處于靜止?fàn)顟B(tài)，當(dāng)肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)或受到機械刺激等損傷時，HSC的表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚停せ畹?span>HSC可通過增生和分泌細胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建，此過程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi)，是合成、分泌細胞外基質(zhì)的主要來源，在肝纖維化的發(fā)生中處于重要地位。肝星形細胞是肝臟的間充質(zhì)細胞，約占肝臟細胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細胞外基質(zhì)的主要細胞群，肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質(zhì)成分，合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結(jié)構(gòu)，還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié)。此外，肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠肝星形采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠肝星狀經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1)試劑盒 ，英文名： ANKRD1 ELISA Kit

Mouse insulin like growth factor binding protein 1 (IGFBP-1) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)試劑盒

Rathypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit 大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGEF(HumanGuanineExchangeFactor)ELISAKit人鳥苷酸交換因子

細胞甘油三酯(iglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次

RatskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISAKit大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠癌標(biāo)志物-CA153試劑盒   96T/48T

小鼠瘤病毒18（HPV-18）試劑盒   96T/48T

小鼠瘤病毒16（HPV-16）試劑盒   96T/48T

小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)試劑盒   96T/48T

NKR-P1G抗體

小鼠壞死因子β(TNF-β)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai thymocyte globulin (ATG) ELISA Kit 人抗細胞球蛋白(ATG)試劑盒

HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit 人分泌型0脂酶A2(sPLA2)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAC-1(Humanadenylylcyclase1)ELISAKit人腺苷酸環(huán)化酶1

(NO)終點比色法定量試劑盒100次

MouseN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體

COLEC12重組食蟹猴 CLP1 / COLEC12 蛋白 Protein

Integrin alpha V 巨噬細胞來源的趨化因子αV多肽 0.5mgIntegrin alpha V 巨噬細胞來源的趨化因子αV多肽

CST1重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白 Protein

ESD Protein Human 重組人 Esterase D / ESD 蛋白

CD55 Protein Mouse 重組小鼠 CD55 / DAF 蛋白

小鼠肝星狀細胞Integrin alpha V 巨噬細胞來源的趨化因子αV多肽 0.5mgIntegrin alpha V 巨噬細胞來源的趨化因子αV多肽

ESD Protein Human 重組人 Esterase D / ESD 蛋白

COLEC12重組食蟹猴 CLP1 / COLEC12 蛋白 Protein

CD55 Protein Mouse 重組小鼠 CD55 / DAF 蛋白

CST1重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白 Protein