細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

小鼠肝內膽管上皮分離自肝臟組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。通過控制激素調控的分泌和吸收，在保持、調整和擴大膽小管的結構中發揮重要作用，肝內膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方面起著積極作用。肝內膽管上皮細胞約占肝細胞總數的5%，其在肝內膽道系統內形成復雜的網狀管形結構。肝內膽管上皮細胞具有復雜的生理代謝功能，參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過程，在肝臟疾病的發生發展過程中起一定的作用。研究表明，常見的肝內膽管病變例如原發性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病，都是以肝內膽管上皮細胞為病變靶位，進而引起肝內膽管上皮損傷。因此，了解正常肝內膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內膽管病變的發病機制、診斷和治療具有重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠肝內膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯合消化，接種至預先包被鼠尾膠原的培養瓶中，通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠肝內膽管上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產品：

大鼠卵白蛋白(OVA)試劑盒 ，英文名： OVA ELISA Kit

Mouse insulin like growth factor binding protein 4 (IGFBP-4) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)試劑盒

RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGDI(HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor)ELISAKit人鳥苷酸解離抑制因子

細胞元素比色法定量試劑盒20次

RatsecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)試劑盒規格：96T/48T

小鼠白介素 -12 (mouse IL-12)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 Biosource

小鼠白介素 -12(p40) (mouse IL-12 p40)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 R&D

小鼠白介素 -12(p70) (mouse IL-12 p70)   作用：   ELISA   規格：   96T   奧地利 Bender

小鼠白介素 -13(p70) (mouse IL-13)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 Biosource

Opticin蛋白抗體

小鼠壞死因子相關凋亡誘導配體1(AIL-R1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai cardiolipin aibody IgG (ACA-IgG) ELISA Kit 人抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)試劑盒

HumanAdenosinediphosphate,ADPELISAKit 人二0酸腺苷(ADP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforACA(Humanai-cenolandcenosomeaibody)ELISAKit人抗中性粒/中心體抗體

一步法平端PCR反應液50次

MouseOncostatin-M,OSMELISAKit小鼠抑瘤素M(OSM)試劑盒規格：96T/48T

聚磷酸肌醇磷酸酶5A抗體

SMPD1重組小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 Protein

白介素1α(IL1α)重組蛋白 Recombinant Interleukin 1 Alpha (IL1a)

CPNE1重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 Protein

ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標簽)

IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (Fc 標簽)

小鼠肝內膽管上皮細胞APP695-770 (Amyloid protein precursor 0.5mgAPP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀粉樣肽前體蛋白(多肽抗原)

ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標簽)

EFNB1重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 Protein

CNTN3 Protein Rat 重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白

MS4A1重組人 CD20 / MS4A1 蛋白 (aa 213-297, His 標簽) Protein

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取