細胞簡介：

小鼠Ⅱ型肺泡上皮分離自肺組織；肺泡由單層上皮細胞構成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經多次反復分枝成無數細支氣管，它們的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡。小肺泡細胞，又稱I型肺泡細胞，厚約0.1微米，基底部是基底膜，無增殖能力。大肺泡細胞，又稱Ⅱ型肺泡細胞，分泌表面活性物質（二棕櫚酰），以降低肺泡表面張力。Ⅱ型肺泡細胞位于Ⅰ型肺泡細胞之間，數量較Ⅰ型肺泡細胞多，但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細胞小。細胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔。細胞核圓形，胞質著色淺、呈泡沫狀。電鏡下，細胞游離而有少量微絨毛，胞質內富含線粒體和溶酶體，有較發達的粗面內質網和高爾基復合體。核上方有較多的分泌顆粒，電子密度高、大小不等，直徑約0.1-1.0μm顆粒內含有平行排列的板層狀結構，稱為嗜餓性板層小體。小體內的主要成分為磷脂，以二棕櫚酰為主，此外還有糖胺多糖及蛋白質等。顆粒內物質釋放出來后，在肺泡表面形成一層粘液層，稱為表面活性物質（surfactant）。表面活性物質有降低肺泡表面張力、穩定肺泡大小的作用。呼氣時肺泡縮小，表面活性物質密度增加，表面張力降低，防止肺泡過度塌陷；吸氣時肺泡擴張，表面活性物質密度減小，肺泡回縮力加大，可防止肺泡過度膨脹。表面活性物質的缺乏或變性均可引起肺不張，過度通氣可造成表面活性物質缺乏；吸入毒氣可直接破壞表面活性物質。Ⅱ型肺泡細胞有分裂、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細胞的潛能，故具有修復受損傷上皮的作用。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠Ⅱ型肺泡上皮采用彈性蛋白酶灌注消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠Ⅱ型肺泡上皮經SP-C免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品：

大鼠巨噬細胞來源趨化因子(MDC)試劑盒 ，英文名： MDC ELISA Kit

Mouse lipoprotein alpha (Lp- alpha) ELISA Kit 小鼠脂蛋白α(Lp-α)試劑盒

Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 大鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFN(MouseFibronectin)ELISAKit小鼠纖連蛋白

細胞肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性比色法定量試劑盒25次

RatphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit大鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)試劑盒規格：96T/48T

小鼠促上腺皮質激素(mouse ACTH)   作用：   ELISA 

小鼠Active Caspase-3   作用：   ELISA 

小鼠Active Caspase-7   作用：   ELISA 

小鼠Active Caspase-8   作用：   ELISA

層粘連蛋白受體1重組兔單克隆抗體

小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat soluble E selectin (sE-selectin) ELISA Kit 大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒

HumanAttacinELISAKit 人抗菌肽(Attacin)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-EJ-aibody，EJ/GlyRS試劑盒人EJ抗體/抗甘氨酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)試劑盒規格：96T/48T

植物脊髓過氧化酶(MPO)活性高質敏感比色法定量試劑盒20次

HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒規格：96T/48T

鈉碘轉運體蛋白抗體

FGFR4重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

CDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依賴性激酶7抗原 0.5mgCDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依賴性激酶7抗原

AK2重組人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

ELK1 Protein Human 重組人 ELK1 蛋白 (His & GST 標簽)

THPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白

小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞CDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依賴性激酶7抗原 0.5mgCDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依賴性激酶7抗原

ELK1 Protein Human 重組人 ELK1 蛋白 (His & GST 標簽)

FGFR4重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

THPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白

AK2重組人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein