兔腎成纖維細胞

| 商品屬性：

| 細胞介紹：

兔腎成纖維分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物，同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環境的穩定，使新陳代謝得以正常進行。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損以及骨創傷的修復有著十分重要的作用。腎成纖維細胞是腎臟結締組織中重要的細胞類型，在體外培養中，一般大致成梭形、多角形或不規則形等，為貼壁生長型細胞。剛分離的腎成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。其主要功能有：①組成過濾屏障內壁的重要部分；②在炎癥和致血栓物質的刺激合成必要的生物活性分子；③受損后影響系膜細胞和上皮細胞，進而影響腎臟病變。

| 方法簡介：

實驗室分離的兔腎成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質量檢測：

實驗室分離的兔腎成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

| 培養信息：

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔腎成纖維體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

| 細胞培養操作：

1）復蘇細胞：將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

| 注意事項：

1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養條件*。若由于培養條件不*而導致細胞出現問 題，責任由客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯系，信息確認后我們為您再免費寄送一次。

4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養，待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯 系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細胞僅供科研使用。

| 公司正在出售的產品

大鼠固醇調節元件結合蛋白1A(SREBP-1A)試劑盒 ，英文名： SREBP-1A ELISA Kit

Rabbit type III procollagen (P III NP) ELISA Kit 兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒

破傷風芽孢梭菌(CT)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMMP-13(HumanMaixmetalloproteinase13)ELISAkit人基質金屬蛋白酶13

體液基質金屬蛋白酶(MMP-3)活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitET-1犬內皮素1

豬雌激素(E)試劑盒   組裝/原裝

豬雌二醇受體(ER)試劑盒   組裝/原裝

豬雌二醇(E2)試劑盒   組裝/原裝

豬傳染性胃腸病毒抗體（TGEV）試劑盒   組裝/原裝

乙型肝炎病毒X蛋白反轉錄蛋白4抗體

γ谷氨酰轉肽酶2輕鏈抗體

PRLR重組小鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 (His 標簽) Protein

低密度脂蛋白受體相關蛋白1(LRP1)重組蛋白 Recombinant Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 1 (LRP1)

ATP5D重組人 ATP5D 蛋白 (His 標簽) Protein

ANP32A Protein Human 重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標簽)

TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白

5-LOX (5-lipoxygenase 0.5mg5-LOX (5-lipoxygenase) 5-脂氧合酶抗原

ANP32A Protein Human 重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標簽)

PGLYRP1重組小鼠 PGLYRP1 / PGRP-S 蛋白 (His 標簽) Protein

IL1R2 Protein Rat 重組大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 標簽)

BLOC1S2重組人 BLOC1S2 / BLOS2 蛋白 (GST 標簽) Protein

兔腎成纖維細胞豬紅細胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒

One pit protein Caveolin1 (Cav-1) ELISA Kit 人窖蛋白Caveolin1(Cav-1)試劑盒

Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISAKit 豬髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒分裝

CLIAKitforAlpha-GST(HumanAlpha-glathioneS-ansferases)ELISAKit人αS轉移酶

血液結構型神經元合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量試劑盒20次

Plagrowthhormone,GHELISAKit植物生長激素(GH)試劑盒