細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞簡介：

兔全骨髓分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時(shí)，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。全骨髓細(xì)胞即骨髓內(nèi)除紅細(xì)胞外的全部細(xì)胞。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔全骨髓采用沖洗骨髓、紅細(xì)胞裂解法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔全骨髓經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：懸浮

細(xì)胞形態(tài)：圓形

傳代特性：不增殖；不傳代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔全骨髓體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白介素1α(IL-1α)試劑盒 ，英文名： IL-1α ELISA Kit

Rabbit maix metalloproteinase 5 (MMP-5) ELISA Kit 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)試劑盒

ELISA 小鼠白介素-17(mouse IL-17)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-3(HumanIerleukin3)ELISAKIT人白介素3

通用型雞馬立克氏病Marek’sdiseasevirus(MDV)試劑盒20次

ELISAKitypsin大鼠

豬細(xì)胞色素氧化酶（CC0）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬戊型肝病毒IgG(HEV-IgG)試劑盒      試劑盒   組裝/原裝

FITC標(biāo)記小鼠CD49d單克隆抗體

病毒(CSFV)試劑盒

Human maix metalloproteinase 8/ neuophil collagenase (MMP-8) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶8/粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)試劑盒

Rabbitprolactin,PRLELISAKit 兔子催乳素(PRL)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforANNA-2/Ri(Humanneuronalnuclearaoaibody)ELISAKit人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體

血液二(MDA)比色法定量試劑盒50次

Porcinegrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISAKit豬促生長激素釋放激素(GHRH)試劑盒

溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族35成員B4抗體

ALCAM重組小鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CDK1 (Cyclin-Dependent Kinase 1 0.5mgCDK1 (Cyclin-Dependent Kinase 1) 周期素依賴性激酶1抗原

OLR1重組人 OLR1 / LOX1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BCL2L1 Protein Human 重組人 BCL2L1 / Bcl-XL 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SFRP1 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

兔全骨髓細(xì)胞CDK1 (Cyclin-Dependent Kinase 1 0.5mgCDK1 (Cyclin-Dependent Kinase 1) 周期素依賴性激酶1抗原

BCL2L1 Protein Human 重組人 BCL2L1 / Bcl-XL 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ALCAM重組小鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

SFRP1 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

OLR1重組人 OLR1 / LOX1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取