細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

兔腦成纖維分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面（約占整個皮質面積的1/3）、內側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

實驗室分離的兔腦成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的兔腦成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔腦成纖維體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產品：

大鼠載脂蛋白C2(APOC2)試劑盒 ，英文名： APOC2 ELISA Kit

Mouse phospho exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 小鼠0酸化細胞外信號調節激酶(pERK)試劑盒

MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKIT 小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHumanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit人絲狀血球凝集素

細胞/組織高粘性多聚賴載玻片制備試劑盒5次(50至100片)

ELISAKitMMP-7大鼠基質金屬蛋白酶7

小鼠甲狀腺素抗體(TAb)試劑盒

小鼠甲狀腺素(T4)試劑盒

小鼠甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒

小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒

鋅指蛋白547抗體

酪蛋白激酶NKF3抗體

AARS重組小鼠 AARS / alanyl-tRNA synthetase 蛋白 Protein

T-細胞免疫調節因子1(TCIRG1)重組蛋白 Recombinant T-Cell, Immune Regulator 1 (TCIRG1)

CXCL11重組人 I-TAC / CXCL11 蛋白 Protein

DAPK3 Protein Human 重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標簽)

EPCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白

CD72分子(CD72)重組蛋白 Recombinant Cluster Of Differentiation 72 (CD72)

DAPK3 Protein Human 重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標簽)

CD6重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CST3 Protein Rat 重組大鼠 Cystatin C / CST3 蛋白

AZGP1重組人 Alpha-2-glycoprotein / AZGP1 蛋白 Protein

兔腦成纖維細胞小鼠淋巴細胞因子ELISA pcr檢測試劑盒

Human prostaglandin E1 (PGE1) ELISA Kit 人前列腺素E1(PGE1)試劑盒

Humanpituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit 人垂體腺苷酸環化酶激活肽(PACAP)pcr檢測試劑盒分裝

Humanadenylylcyclase1,AC-1試劑盒人腺苷酸環化酶1(AC-1)試劑盒規格：96T/48T

植物ATP生物發光法定量試劑盒50次

Mousealkalinephosphatase,ALPELISAKit小鼠堿性0酸酶(ALP)試劑盒規格：96T/48T

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取