細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔腦膜分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，一共有三層，由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。腦膜細(xì)胞圍繞著大腦，參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細(xì)胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔腦膜采用消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔腦膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔腦膜體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素1(PCSK1)試劑盒 ，英文名： PCSK1 ELISA Kit

Mouse von Willebrand factor / ristocetin cofactor (vWF) ELISA Kit 小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)試劑盒

Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISAKit 大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGR-AlphaELISAKit大鼠糖皮質(zhì)激素受體α

細(xì)胞蛋酸酶1(PP1)活性比色法定量試劑盒20次

RatTotalbileacide,TBAELISAKit大鼠總膽汁酸(TBA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠酸性0酸酶試劑盒   小鼠酸性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠酸性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠酸性0酸酶試劑盒、小鼠酸性0酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒   小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒   小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原N末端肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒   豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒、豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

CGG結(jié)合蛋白1抗體

小鼠酶2(CA-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat activated protein C (APC) ELISA Kit 大鼠活化蛋白C(APC)試劑盒

HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit 人P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Cobravenomfactor,CVF試劑盒毒蛇因子(CVF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mouseendotoxin,ETELISAKit小鼠內(nèi)毒素(ET)試劑盒規(guī)格：96T/48T

甘-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體

FGF12重組狗 FGF12 蛋白 Protein

Nurr1 核受體相關(guān)因子-1(抗原 0.5mgNurr1 核受體相關(guān)因子-1(抗原)

PRKD2重組人 PRKD2 / PKD2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CHN1 Protein Human 重組人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

OSM Protein Mouse 重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白

兔腦膜細(xì)胞Nurr1 核受體相關(guān)因子-1(抗原 0.5mgNurr1 核受體相關(guān)因子-1(抗原)

CHN1 Protein Human 重組人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

FGF12重組狗 FGF12 蛋白 Protein

OSM Protein Mouse 重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白

PRKD2重組人 PRKD2 / PKD2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein