細胞簡介：

兔海綿體平滑肌分離自海綿體組織；海綿體，又稱海綿體肌，是硬的平滑肌和結締組織。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅厚的白膜，內部由結締組織和平滑肌組成海綿狀支架，其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質的膠原中，在消化海綿體組織時，膠原酶的作用主要是松解海綿體內皮細胞與基膜的聯系，破壞海綿體內皮細胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細胞。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

方法簡介：

實驗室分離的兔海綿體平滑肌采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的兔海綿體平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3-5代左右；3代以內狀態佳

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔海綿體平滑肌體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品：

大鼠三葉因子3(TFF3)試劑盒 ，英文名： TFF3 ELISA Kit

Mouse signal ansduction molecule (Smad1) ELISA Kit 小鼠信號轉導分子(Smad1)試劑盒

Ratcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 大鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHABPELISAKit大鼠透明質酸結合蛋白

細胞半胱蛋白酶-7(CASPASE-7)活性熒光定量試劑盒20次

Ratverylateappearingaigen,VLAELISAKit大鼠遲現抗原(VLA)試劑盒規格：96T/48T

小鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)試劑盒   96T/48T

小鼠顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒   96T/48T

小鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒   96T/48T

3號染色體開放閱讀框17抗體

小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human blood coagulation factor XII (F XII) ELISA Kit 人Ⅻ(FⅫ)試劑盒

Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRPELISAKit 人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human20-hydroxyeicosateaenoicacid,12-HETE試劑盒人12羥二十烷四烯酸(12-HETE)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母纖維二糖酶(cellobiase)活性比色法定量試劑盒20次

MouseApolipoproteinH,Apo-HELISAKit小鼠載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒規格：96T/48T

蛋白激酶C抗體

CST6重組小鼠 Cystatin E / CST6 蛋白 Protein

半胱蛋白酶抑制劑3(CST3)重組蛋白 Recombinant Cystatin 3 (CST3)

CSNK2A2重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 Protein

CSNK1G2 Protein Human 重組人 CSNK1G2 蛋白

KLRC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 蛋白 (Fc 標簽)

兔海綿體平滑肌細胞Angiotensin II receptor(Ang II 0.5mgAngiotensin II receptor(Ang II ) 血管緊張素Ⅱ受體(抗原)

CSNK1G2 Protein Human 重組人 CSNK1G2 蛋白

FZD10重組小鼠 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein

IL20RB Protein Rat 重組大鼠 IL20RB 蛋白 (Fc 標簽)

TEK重組人 Tie2 / CD202b / TEK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein