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人淋巴結成纖維細胞

參  考  價:2800 - 6200 /件
具體成交價以合同協議為準
  • 型號

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    其他品牌

  • 廠商性質

    生產商

  • 所在地

    上海市

更新時間:2025-01-03 11:54:43瀏覽次數:54次

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生長特性 貼壁 組織來源 淋巴
細胞形態 成纖維細胞樣 產品貨號 YS-01X8300
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細胞簡介:

人淋巴結成纖維細胞

人淋巴結成纖維分離自淋巴組織;淋巴結是呈橢圓形或蠶豆形的淋巴組織小體,大小不一,新鮮時呈灰紅色。穿插于淋巴管的行程中,并與淋巴管相通連。淋巴結主要由淋巴組織和淋巴竇組成,外面包以致密結締組織被膜,被膜向淋巴結內伸入,形成許多間隔或小梁,構成淋巴結的網狀支架,并把淋巴結實質分隔成許多部分。這些結締組織由成纖維細胞構成,對淋巴管起到保護和支持作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介:

人淋巴結成纖維細胞

實驗室分離的人淋巴結成纖維采用混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測:

人淋巴結成纖維細胞

實驗室分離的人淋巴結成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品名稱

人淋巴結成纖維細胞

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

組織來源

淋巴

產品貨號

YS-01X8300

生長特性

貼壁

細胞形態

成纖維細胞樣

 


培養信息:

人淋巴結成纖維細胞

培養基:基礎培養基,含FBSbFGFInsulinPenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態:成纖維細胞樣

傳代特性:可傳3-5代左右;3代以內狀態佳

消化液:0.25%

培養條件:氣相:空氣,95%CO25%

人淋巴結成纖維體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。

人淋巴結成纖維細胞

細胞傳代步驟:
人淋巴結成纖維細胞
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞復蘇步驟:
人淋巴結成纖維細胞
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟:
人淋巴結成纖維細胞
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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