細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

人滑膜成纖維（骨性關節炎）分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關節腔內面的內襯結構，各種關節內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構，同時在各種關節疾患中也是主要病變部位。骨關節炎（OA）以關節軟骨退行性變為特征，其病理改變累及關節的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關節的退變?；ぜ毎菢嫵苫拥拇蠹毎后w，是維持關節正常功能的重要組織結構，它包埋在顆粒狀無定性的基質中，基質內有分散的纖維分布?；び?span>A型（巨噬樣滑膜細胞）、B型（成纖維樣滑膜細胞）以及C型（樹突細胞樣滑膜細胞）細胞組成。類風濕關節炎（RA）是一種病因未明的慢性、以炎性滑膜炎為主的系統性疾病。其特征是手、足小關節的多關節、對稱性、侵襲性關節炎癥，經常伴有關節外器官受累及血清類風濕因子陽性，可以導致關節畸形及功能喪失。RA的發病可能與遺傳、感染、性激素等有關。RA關節炎的病理主要有滑膜襯里細胞增生、間質大量炎性細胞浸潤，以及微血管的新生、血管翳的形成及軟骨和骨組織的破壞等。體外培養人類風濕關節炎滑膜成纖維細胞對于研究類風濕關節炎疾病的發生機理、治療具有重要意義。退行性骨關節病又稱骨關節炎（OA）、退行性關節炎、老年性關節炎、肥大性關節炎，是一種退行性病變，系由于增齡、肥胖、勞損、創傷、關節先天性異常、關節畸形等諸多因素引起的關節軟骨退化損傷、關節邊緣和軟骨下骨反應性增生。本病多見于中老年人群，好發于負重關節及活動量較多的關節（如，頸椎、腰椎、膝關節、髖關節等）。過度負重或使用這些關節，均可促進退行性變化的發生。臨床表現為緩慢發展的關節疼痛、壓痛、僵硬、關節腫脹、活動受限和關節畸形等。

方法簡介：

實驗室分離的人滑膜成纖維（骨性關節炎）采用混合酶消化結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的人滑膜成纖維（骨性關節炎）經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3-5代左右

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

人滑膜成纖維(骨性關節炎）體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產品：

大鼠間隙連接蛋白43(CX43)試劑盒 ，英文名： CX43 ELISA Kit

Inu Susuke factor II (HC II) ELISA Kit 犬肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)試劑盒

RatAi-ypsin,ATELISAKit 大鼠抗(AT)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFFAELISAKit大鼠游離脂肪酸

細胞基質金屬蛋白酶(MMP-14)活性熒光定量試劑盒20次(10樣本)

RatOrexinAELISAKit大鼠阿立新A(OrexinA)試劑盒規格：96T/48T

乳鐵蛋白（ Lactoferrin ）   作用：   ELISA  

白血病抑制因子 (LIF)   作用：   ELISA  

脂蛋脂酶 A2(LP-PLA2)   作用：   ELISA  

脂肪細胞刺激因子 (LSP)   作用：   ELISA

ADP核糖基化樣因子ARL3抗體

豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat androgen (androgen) ELISA Kit 大鼠雄激素(androgen)試劑盒

Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgG,β2-GP1AbIgGELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1AbIgG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCX3C-chemokinereceptor1,CX3CR1試劑盒人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)試劑盒規格：96T/48T

組織ERK1/2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanprogesteronereceptor，PGRELISAKit人孕同受體(PGR)試劑盒規格：96T/48T

驅動蛋白家族成員12抗體

CLMP重組人 ASAM / CLMP 蛋白 Protein

血管活性腸肽(VIP)重組蛋白 Recombinant Vasoactive Intestinal Peptide (VIP)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL18R1 Protein Human 重組人 IL18R1 / CD218a 蛋白

Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 (aa 1-725, His 標簽)

人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎)血管活性腸肽(VIP)重組蛋白 Recombinant Vasoactive Intestinal Peptide (VIP)

IL18R1 Protein Human 重組人 IL18R1 / CD218a 蛋白

CLMP重組人 ASAM / CLMP 蛋白 Protein

Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 (aa 1-725, His 標簽)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。