細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人胰島β分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細(xì)胞分泌胰島素，降低血糖；γ細(xì)胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌；PP細(xì)胞分泌胰多肽，抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。胰島β細(xì)胞，即胰島B細(xì)胞，是胰島細(xì)胞的一種，屬內(nèi)分泌細(xì)胞的一種，能分泌胰島素，與胰島α細(xì)胞分泌的胰高血糖素一起起到調(diào)節(jié)血糖的作用。胰島B細(xì)胞功能受損、胰島素分泌絕對(duì)或相對(duì)不足（胰島素抵抗），會(huì)使血糖升高，從而引發(fā)糖尿病。而胰島B細(xì)胞癌變會(huì)生成胰島素瘤，引起惡性血糖降低癥狀。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胰島β采用先用膠原酶消化分離得到胰島、再用逐級(jí)消化胰島制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胰島β經(jīng)Insulin含量檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠激活素A(Activin A)試劑盒 ，英文名： Activin A ELISA Kit

Mouse Ureaplasma urealyticum aibody (UU-Ab) ELISA Kit 小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒

MouseCollagenaseIELISAKit 小鼠膠原酶I(CollagenaseI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanPancreaticcarcinomamarkers-CA242ELISAKit人胰腺癌標(biāo)志物CA242

同位素標(biāo)記放射活性濾膜法試劑盒20次

ELISAKitP-PKC大鼠0酸化蛋白激酶C

小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠抗核抗體(ANA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

ALL1相關(guān)蛋白抗體

小鼠鼠白細(xì)胞分化抗原44(CD44)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ataxia telangiectasia mated (ATM) ELISA Kit 人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因(ATM)試劑盒

Humanai-lymphocyteglobulin,ALGELISAKit 人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

E試劑盒魚雌激素規(guī)格：96T/48T

增強(qiáng)型HRP-AEC底物顯色試劑盒10次

MouseCyclin-D3ELISAKit小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人胎盤泌乳素抗體

CLEC10A重組小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 Protein

S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12)重組蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A12 (S100A12)

CALR重組人 CALR / Calreticulin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白

CD1E & B2M Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 蛋白

人胰島β細(xì)胞S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12)重組蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A12 (S100A12)

CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白

CLEC10A重組小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 Protein

CD1E & B2M Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 蛋白

CALR重組人 CALR / Calreticulin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。