細胞簡介：

人心肌成纖維分離自心臟組織；心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成，非心肌細胞占細胞總數的70%，其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的心肌成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。近年來，人們逐漸了解到非心肌細胞不僅對心肌細胞具有結構上的支持、保護作用，而且還具有自分泌和旁分泌功能，影響心肌細胞的結構和生理功能；心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結構支持作用并負責細胞基質外的合成，當心肌損傷時能產生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結締組織中常見的細胞，可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網狀纖維及有機基質，并且在外傷等因素刺激下，部分纖維細胞可重新轉變為幼稚的成纖維細胞，其功能活動也得以恢復，參與組織損傷后的修復。因此，對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現代心血管領域研究的一個重點。

方法簡介：

公司實驗室分離的人心肌成纖維采用膠原酶-聯合消化結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人心肌成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品：

大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)試劑盒 ，英文名： IGFBP3 ELISA Kit

Mouse visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 小鼠內臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒

MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKIT 小鼠血管內皮細胞生長因子(VEGF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISAKit人cAMP反應元件結合蛋白

細胞AX1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitALP-B大鼠骨特異性堿性0酸酶B

小鼠結合蛋白4(RBP-4)試劑盒   96T/48T

小鼠結合蛋白(RBP)試劑盒   96T/48T

小鼠生長因子(GH)試劑盒   96T/48T

小鼠(SS)試劑盒   96T/48T

鹵酸脫鹵酶樣水解酶域內含蛋白1A抗體

小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)試劑盒 96T/48T

Rat myosin (Myosin) ELISA Kit 大鼠肌球蛋白(Myosin)試劑盒

Humanneuraminidase,NAELISAKit 人神經酶(NA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2試劑盒鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞樣品蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mousedopamine,DAELISAKit小鼠多巴胺(DA)試劑盒規格：96T/48T

早期發育調控蛋白1/EDR1抗體

IL20RB重組大鼠 IL20RB 蛋白 Protein

GPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7 0.5mgGPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7) 0脂酰基醇蛋白聚糖-3(多肽)

CD28重組人 CD28 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein

CLEC10A Protein Human 重組人 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 標簽)

EPHB1 Protein Mouse 重組小鼠 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His & GST 標簽)

人心肌成纖維細胞GPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7 0.5mgGPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7) 0脂酰基醇蛋白聚糖-3(多肽)

CLEC10A Protein Human 重組人 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 標簽)

IL20RB重組大鼠 IL20RB 蛋白 Protein

EPHB1 Protein Mouse 重組小鼠 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His & GST 標簽)

CD28重組人 CD28 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein