α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)樣本的前處理:
組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:
①稱取約0.1g組織或收集500萬細菌或細胞,加入1mL試劑一和10uL?試劑三,用冰浴勻漿 器或研缽勻漿。
②將勻漿600g,4℃離心5min。
③棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。
④上清液即胞漿提取物,可用于測定從線粒體泄漏的α-KGDH(此步可選做)。
⑤在步驟④的沉淀中加入200uL試劑二和2uL?試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W, 超聲3秒,間隔10秒,重復30次),用于線粒體α-KGDH活性測定。
測定原理:α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+?和輔酶A生成琥珀酰輔酶A、二氧化碳和?NADH,NADH在340?nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。自備實驗用品及儀器:紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
磷酸化動力相關蛋白1抗體
DNA連接酶4抗體
二肽基肽酶6抗體
二氫葉酸還原酶抗體
有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體
有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體
DOM3Z蛋白抗體
蓬亂蛋白2抗體
磷酸化蓬亂蛋白2抗體
轉錄下調蛋白1抗體
脫氫酶/還原酶家族成員2抗體
牙本質磷蛋白抗體
Dermokine β蛋白抗體
DPCR1蛋白抗體
表皮乳頭源性蛋白6抗體
雙特異性蛋白磷酸酶7抗體
雙特異性蛋白磷酸酶26抗體
阿米洛利結合蛋白1抗體
S期激酶活化蛋白DBF4A抗體
著絲粒相關蛋白DSN1抗體
雙皮層蛋白結構域蛋白DCDC2抗體
神經干細胞樹突調節蛋白DAGLα抗體
對接蛋白4抗體
DULLARD蛋白抗體
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MNB抗體
無胸腺癥相關蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關鍵基因6抗體
朊蛋白DPL抗體
肌強直性營養不良蛋白激酶抗體
有絲分裂控制蛋白dis3抗體
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