丙酮酸(PA)活性測試盒(三羧酸循環類)

產品規格 : 100管/96樣

質量標準：企業標準

測試方法：微量法

產品包裝：液體盒裝

運輸條件：快遞包郵

應用范圍：僅供科研研究使用

保存條件：低溫避光保存

供 應 商： 上海紀寧實業有限公司

測定意義：

丙酮酸通過乙酰CoA 連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝，起著重要的樞紐作用。

測定原理：

在堿性溶液中呈顯色。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰、蒸餾水。

注   意 ：

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

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試劑的組成和配制：

提取液：液體100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體2.5mL×1 瓶， 4℃保存；

試劑二：液體12.5mL×1 瓶， 4℃保存。

丙酮酸提取：

1、細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量

（104 個）：提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議500 萬細菌或細胞加入1mL 提 取液），超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30 次），靜置30min， 8000g，25℃離心10min，取上清待測。

2、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，

加入1mL 提取液），進行冰浴勻漿，靜置30min，8000g，25℃離心10min，取上清待測。

3、血清（漿）樣品：按照血清（漿）體積（mL）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建

議取0.1mL 血清（漿）加入1mL 提取液），進行冰浴勻漿，靜置30min， 8000g，25℃離心

10min，取上清待測。

測定步驟：

1、 分光光度計或酶標儀預熱30min 以上，調節波長至520nm，蒸餾水調零。

2、在微量石英比色皿或96 孔板中加入75μL 樣本和25μL 試劑一，混勻，靜置2min，加入

125μL 試劑二，混勻，于520nm 波長處測定管吸光值A。