名  稱(chēng)：小鼠白介素-10（IL-10）ELISA試劑盒

規(guī)  格：96T/48T

性  狀：液體

貯  藏：避光防潮保存

包  裝：盒裝

用  途：用于測(cè)定血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性

提  示：我司ELISA檢測(cè)試劑盒僅供科研實(shí)驗(yàn)，不得用于其他用途，使用前仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

試驗(yàn)原理：

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)（EISA）即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)，該技術(shù)用于檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。

操作步驟：

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時(shí)，均需充分混勻，并盡量避免起泡。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔，空白孔加標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液 100μL，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100μL，注意不要有氣泡，加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育 90 分鐘，為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌，每個(gè)孔中加入生-物素化抗體工作液 100μL（在使用前15 分鐘內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育 1 小時(shí)。

3. 棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3 次，每次浸泡 1-2 分鐘，大約 350μL/每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

4. 每孔加酶結(jié)合物工作液（臨用前 15 分鐘內(nèi)配制）100μL，加上覆膜，37℃溫育30 分鐘。

5. 棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5 次，方法同步驟3。

6. 每孔加底物溶液(TMB)90μL，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15 分鐘左右（根據(jù)實(shí)際顯色酌情縮短或延長(zhǎng)，但不可超過(guò)30 分鐘，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí)，即可終止）。

7. 每孔加終止液 50μL，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)，終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物溶液的加入順序相同。

8. 立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度（OD 值），應(yīng)提前打開(kāi)酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測(cè)程序。

9. 實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存。

小鼠白介素-10（IL-10）ELISA試劑盒

實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)：

1、有試劑不能與皮膚直接接觸。

2、務(wù)必使用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，不準(zhǔn)用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。

3、取完一種試劑后，應(yīng)將工具洗凈、擦干后，方可取用另一種試劑。

4、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后將瓶放回原處。

5、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶?jī)?nèi)。