用純化的REG-4抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的REG-4抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的REG-4呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（ 值），計算樣品濃度。

1、 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4 過夜后于1000 g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20或-80 保存，但應避免反復凍融。

2、 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于 1000 g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20 或-80 保存，但應避免反復凍融。

3、 其它生物標本：請1000 g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20 或-80 保    存，但應避免反復凍融。

1、 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?nbsp;100 ，余孔分別加標準品或待測樣品100 ，注意不要有氣泡，加樣 時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37溫育2小時。為保證實驗結果有效

用純化的REG-4抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的REG-4抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的REG-4呈正相關。用酶標儀在450nm波長測定吸光度（ 值），計算樣品濃度

說明

1、  由于現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，

    本產品可能存在一定的質量技術風險。

2、  zui終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環境密切相關，請務必

準備充足的標本備份。

3、 只有全部使用試劑才能保證檢測效果，因為所有試劑都是有關聯的，不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守試劑的實驗說明才會得到的檢測結果。

4、 在儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和微生物的   污染，因為蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。

5、 試劑盒保存：請收到試劑盒后盡快將標準品、檢測溶液A和檢測溶液B保存于-20 ，其余試劑短期保存請置于4 ，長期保存則置于-20 。開封后的酶標板要密封加干燥劑后保存于-20 ，避免潮濕。

6、 濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

7、 剛開啟的酶聯板孔中可能會有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響。

8、 有效期：6個月。

9、 本操作說明適用于48T試劑盒，但48T試劑盒所有試劑減半。

2、 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加

用純化的REG-4抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的REG-4抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的REG-4呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（ 值），計算樣品濃度。

1、  由于現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，

    本產品可能存在一定的質量技術風險。

2、  zui終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環境密切相關，請務必

準備充足的標本備份。

3、 只有全部使用劑才能保證檢測效果，因為所有試劑都是有關聯的，不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守試劑的實驗說明才會得到的檢測結果。

4、 在儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和微生物的   污染，因為蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。

5、 試劑盒保存：請收到試劑盒后盡快將標準品、檢測溶液A和檢測溶液B保存于-20 ，其余試劑短期保存請置于4 ，長期保存則置于-20 。開封后的酶標板要密封加干燥劑后保存于-20 ，避免潮濕。

6、 濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

7、 剛開啟的酶聯板孔中可能會有少許水樣物質，此為正?，F象，不會對實驗結果造成任何影響。

8、 有效期：6個月。

9、 本操作說明適用于48T試劑盒，但48T試劑盒所有試劑減半。

 100 （臨用前配制），酶標板加上覆膜，37 溫育1小時。

3、 棄去孔內液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400 /每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4、 每孔加檢測溶液B工作液（臨用前配制）100 ，加上覆膜，37 溫育1小時。

5、 棄去孔內液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6、 每孔加底物溶液90 ，酶標板加上覆膜37 避光顯色（反應時間控制在15-30分鐘，當標準孔的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯時，即可終止）。

7、 每孔加終止溶液50 ，終止反應，此時藍色立轉。終止液的加入順序應盡量與底物    液的加入順序相同。

8、 立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度（ 值）。

洗板方法

1、 手工洗板方法：將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內，浸泡1-2分鐘，吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體，在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；根據需要，重復此過程數次。

2、 自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

特異性

    本試劑盒可同時檢測重組或天然的人REG-4，且與其它相關蛋白無交叉反應。

計算

  各標準品及樣本 值扣除空白孔 值后作圖（七點圖），如設置復孔，則 應取其平均值計算。以標準品的濃度為縱坐標（對數坐標）， 值為橫坐標（對數坐標），在對數坐標紙上繪出標準曲線。推薦使用專業制作曲線軟件進行分析，如 curve expert 1.3，根據樣品 值，由標準曲線查出相應的濃度，乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與 值計算出標準曲線的回歸方程式，將樣品的 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

檢測范圍：3.12 ng/ml - 200 ng/ml，繪制標準曲線請取用以下濃度值：200 ng/ml，100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml。

zui低檢測限：0.78 ng/ml

說明

1、  由于現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，

    本產品可能存在一定的質量技術風險。

2、  zui終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環境密切相關，請務必

準備充足的標本備份。

3、 只有全部使用試劑才能保證檢測效果，因為所有試劑都是有關聯的，不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守試劑的實驗說明才會得到的檢測結果。

4、 在儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和微生物的   污染，因為蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。

5、 試劑盒保存：請收到試劑盒后盡快將標準品、檢測溶液A和檢測溶液B保存于-20 ，其余試劑短期保存請置于4 ，長期保存則置于-20 。開封后的酶標板要密封加干燥劑后保存于-20 ，避免潮濕。

6、 濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

7、 剛開啟的酶聯板孔中可能會有少許水樣物質，此為正?，F象，不會對實驗結果造成任何影響。

8、 有效期：6個月。

9、 本操作說明適用于48T試劑盒，但48T試劑盒所有試劑減半。