測微尺分物鏡測微尺(簡稱物微尺或臺微尺)和目鏡測微尺(簡稱目微尺),兩者配合使用,可以測量細胞大小。目微尺是一個可以放在目鏡內的特制玻璃圓片,圓片*刻有一條直線,此線分為若干格。物微尺為一載玻片*封固的小尺,長1mm,被等分為100格,長為 0.01mm (10μm)。
當測量細胞大小時,不能用物微尺直接測量細胞,而只能使用目微尺。因目微尺測量的細胞是經物鏡放大后的像,而它每格所代表的實際長度隨物鏡的放大率而變,在測量時需要先用物微尺來標定,求出某一放大率時目微尺每格所代表的實際長度,然后再用以測定細胞大小。
將物微尺放在顯微鏡的載物臺上,小心轉動目鏡測微尺,移動物微尺使兩尺平行,起點線重合,然后找出另一處兩尺刻度重合處,記錄起點線到重合線之間的各尺的刻度數(格數),按下式計算,在該放大系統下目微尺每格所代表的實際長度:
目微尺每格所代表的實際長度 = (物微尺格數/目微尺格數)× 10μm
測量某一細胞時,如果目微尺測得其橫徑為5格,則此細胞橫徑為8×5=40μm。
0.9%生理鹽水、0.1%亞甲基蘭、蒸餾水、吸水紙
普通光學顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、消毒牙簽、燒杯、吸管
口腔黏膜上皮細胞;洋蔥內表皮;西紅柿;芹菜;韭菜;紅辣椒。
(一)、細胞形態結構的觀察:
1、涂片法:人口腔上皮細胞的觀察:
1)、在潔凈的載玻片*,滴一滴生理鹽水。
2)、用消毒牙簽的一端,在漱凈的口腔側壁上輕輕地刮幾下。
3)、把牙簽上附有碎屑的一端,放在載玻片上的生理鹽水滴中涂勻。
4)、用鑷子夾起潔凈的蓋玻片,將它的一邊先接觸載玻片上的生理鹽水滴,然后,輕輕地蓋在水滴上。然后在蓋片的一側加一滴0.1%亞甲基
蘭染液,在蓋片的另一側用吸水紙吸取,染色后細胞核被染成深藍色,細胞質淺藍色。
5)、用顯微鏡觀察細胞形狀,細胞呈扁平鱗狀。
2、西紅柿果肉細胞涂片制作似人口腔上皮細胞,但將生理鹽水換成蒸餾水,且不必染色就可直接觀察。細胞大小和形狀如何?
3、撕片法:撕一小片植物表皮(洋蔥、芹菜和韭菜),放在盛有一小滴蒸餾水的載玻片上,用鑷子展平,蓋上蓋玻片在顯微鏡下觀察。細胞大小和形狀如何?
4、取紅辣椒一片,用刀片刮去果肉,將表皮制成臨時裝片,用顯微鏡觀察表皮細胞,能看見胞間連絲嗎?
(二)、細胞大小的測定:
1、將目微尺放于目鏡內。
2、將物微尺放在顯微鏡的載物臺上。
3、小心轉動目鏡測微尺,移動物微尺使兩尺平行,起點線重合,然后找出另一處兩尺刻度重合處。
4、記錄起點線到重合線之間的各尺的刻度數(格數),按下式計算,在該放大系統下目微尺每格所代表的實際長度:
目微尺每格所代表的實際長度 = 物微尺格數/目微尺格數 × 10μM
5、將制作的各種細胞臨時裝片置于載物臺上,測定細胞的大小(包括長徑和短徑)。
1、制作臨時裝片時避免產生氣泡。
2、用物微尺標定的目微尺每格長度的數值代表在某一放大系統下的情況,這一數值會隨物鏡的放大率而改變,因此,在什么放大倍數物鏡下標定 的目微尺只能在同一放大倍數的物鏡下測定細胞的大小。