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技術(shù)文章

高活力蛋清*制備材料與方法

閱讀:1156發(fā)布時間:2012-2-15

高活力蛋清*制備

1材料與方法

1.1材料與儀器

1.1.1材料鮮雞蛋,市售;溶壁微球菌,購于*微生物研究所;標(biāo)準(zhǔn)*(;20000/)購于公司;陽離子交換樹脂,選用南開化工廠724型樹脂;其他試劑均為分析純.

1.1.2儀器722型分光光度計(jì),上海棱光技術(shù)有限公司提供;自動柱層析儀,瑞典產(chǎn);噴霧干燥器,瑞士產(chǎn);凝膠成像分析系統(tǒng),美國產(chǎn).1.2檢測方法

1.2.1*活力的測定詳見文獻(xiàn)『81.1.2.2酶蛋白含量的測定酶蛋白含量采用一酚法9】=914定.

1.2.3*純度的測定*純度采用聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定,并用凝膠成像系統(tǒng)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的采集和分析.

1.3*提取工藝流程鮮蛋一預(yù)處理一攪拌吸附一上柱洗脫一等電點(diǎn)沉淀一透析一噴霧干燥一成品.

1.4操作要點(diǎn)

(1)預(yù)處理.將新鮮雞蛋洗凈,破殼,收集蛋清,過銅篩,除雜物,慢速攪拌均勻.
(2)攪拌吸附.將蛋清和樹脂按照一定比例混勻,進(jìn)行攪拌吸附.
(3)洗脫.樹脂蛋清分離后,用蒸餾水充分清洗樹脂,進(jìn)行動態(tài)洗脫,收集洗脫液備用.
(4)等電點(diǎn)沉淀.將洗脫液的值調(diào)節(jié)至0.5,在4下靜置,待沉淀*后,離心收集沉淀得粗酶.將粗酶調(diào)節(jié)至一定濃度備用.
(5)透析.將酶液透析過夜.
(6)噴霧干燥.固定出風(fēng)溫度,以不同的進(jìn)風(fēng)溫度進(jìn)行噴霧干燥.2結(jié)果與分析2.1攪拌吸附條件的優(yōu)化攪拌吸附是制備*的重要工序,直接影響到酶收率和酶活力.采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)確定攪拌吸附階段中蛋清與樹脂的比例和攪拌時間.


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