人基質金屬蛋白酶-13ELISA 檢測試劑盒
本試劑僅供研究使用 標本：血清或血漿
試驗原理：
MMP-13試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知MMP-13濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將MMP-13和*標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中MMP-13的濃度呈比例關系。
自備材料
蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
人基質金屬蛋白酶-13ELISA 檢測試劑盒
操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
人基質金屬蛋白酶-13ELISA 檢測試劑盒
操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。
試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。
人基質金屬蛋白酶-13ELISA 檢測試劑盒
結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的MMP-13標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的MMP-13含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍：0-800ng/ml
4、敏感度： 1.0 ng/ml
Fumonisin B1 伏馬菌素 B1 [116355-83-0] 5mg
Dextrin 糊精 [9004-53-9] 250g
Diacetone acrylamide 雙丙酮丙烯酰胺 [2873-97-4] 100g
Diacetone alcohol 雙丙酮醇 [123-42-2] 250ml
Diacetoxyscirpenol 二乙酰鑣草鐮刀菌烯醇 [2270-40-8] 5mg
Dimidium bromide 溴化底米鎓 [518-67-2] 1g
Diphenic acid 2,2'-聯苯二甲酸 [482-05-3] 25g
Direct blue 71 直接藍71 [4399-55-7] 25g
Diacetyldioxime 二甲基乙二醛肟 [95-45-4] 25g
Diacetyl monoxime 二乙酰一肟 [57-71-6] 10g
（+）-N,N′-Diallyltartramide 己二烯酒石酸二胺 [58477-85-3] 5g
1,4-Diaminoanthraquinone 1,4-二氨基蒽醌 [128-95-0] 25g
4,4’-Diaminodiphenyl ether 4，4-二氨基二苯醚 [101-80-4] 100g
4,4’-Diaminodiphenyl methane 4，4-二氨基二苯甲烷 [101-77-9] 500g
4,4’-Diaminodiphenyl sulfone 4,4-二氨基二苯砜 [80-08-0] 50g
1,6-Diaminohexane 1,6-己二胺 [124-09-4] 100g
1,6-Diaminohexane 1,6-己二胺 [124-09-4] 500g
1,5-Diaminonaphthalene 1,5-二氨基萘 [2243-62-1] 25g
1,4-3,6-Dianhydro-D-mannitol 1,4-3,6-雙脫水* [641-74-7] 5g
Diantipyrylmethane 二*甲烷 [1251-85-0] 100g
Diaphorase 心肌黃酶 [9001-18-7] 1KU
Diaphorase 心肌黃酶 [9001-18-7] 2KU
Diatomaceous earth 硅藻土 [68855-54-9] 50g
1,8-Diazabicyclo 二氮雜二環 [6674-22-2] 100g
Dibenzoyl-D-tartaric acid, monohydrate D（+）-二苯甲酰酒石酸一水 [80822-15-7] 25g
Dibenzoyl-D-tartaric acid, monohydrate D（+）-二苯甲酰酒石酸一水 [80822-15-7] 100g
Dibenzoyl-L-tartaric acid, monohydrate L（-）-二苯甲酰酒石酸一水 [62708-56-9] 25g
Dibenzoyl-L-tartaric acid, monohydrate L（-）-二苯甲酰酒石酸一水 [62708-56-9] 100g
N,N′-Dibenzylethylenediamine N,N-二芐基乙二胺DBE [140-28-3] 25g
9,10-Dibromoanthracene 9,10-二溴蒽 [523-27-3] 25g
2,5-Dibromobenzoic acid 2,5-二溴苯甲酸 [610-71-9] 25g
trans-2,3-Dibromo-2-butene-1,4-diol 2,3-二溴丁烯-1,4-二醇 [3234-02-4] 500g
3,5-Dibromo-4-hydroxybenzaldehyde 二溴醛 [2973-77-5] 100g
2,6-Dibromophenol 2,6-二溴* [608-33-3] 25g
2,3-Dibromosuccinic acid 2,3-二溴丁二酸 [526-78-3] 100g
Dibutyl maleate 順丁烯二酸二丁酯 [105-76-0] 250g
2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol 2,6-二叔丁基對甲酚 [128-37-0] 250g
Dibutyltin dilaurate 二丁基二月桂酸錫 [77-58-7] 100g
Dibutyryl cyclic-AMP, sodium salt 二丁酰*鈉 [16980-89-5] 100mg
Dicamba 麥草畏 [1918-00-9] 100g
2,3-Dichlorobenzenaldehyde 2,3-二氯苯甲醛 [6334-18-5] 100g
2,4-Dichlorobenzenaldehyde 2,4-二氯苯甲醛 [874-42-0] 250g
2,6-Dichlorobenzenaldehyde 2,6-二氯苯甲醛 [83-38-5] 100g
1,3-Dichlorobenzene 1,3-二氯苯 [541-73-1] 250ml
1,4-Dichlorobenzene 1,4-二氯苯 [106-46-7] 1kg
Fast blue RR salt 固藍RR鹽 [14726-29-5] 5g
2,3-Dichlorobenzoic acid 2,3- 二氯苯甲酸 [50-45-3] 100g
2,5-Dichlorobenzoic acid 2,5- 二氯苯甲酸 [50-79-3] 500g
2,6-Dichlorobenzoic acid 2,6- 二氯苯甲酸 [50-30-6] 500g
3,5-Dichlorobenzoic acid 3,5-二氯苯甲酸 [51-36-5] 100g
2,3-Dichloro-5,6-dicya,4-benzoquinone 二氯二氰基苯醌 [84-58-2] 100g
4,5-Dichlorofluorescein 4，5-二氯熒光素 [2320-96-9] 25g
3,5-Dichloro-2-hydroxy-benzenesulfonic acid sodium salt 3,5-二氯-2-羥基苯磺酸鈉 [54970-72-8] 5g
