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研域(上海)化學試劑有限公司


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96T人*脫羧酶65抗體ELISA 檢測試劑盒

閱讀:219發布時間:2012-07-25

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人*脫羧酶65抗體ELISA 檢測試劑盒            

本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

試驗原理:
    GAD65-Ab試劑盒是間接法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知GAD65-Ab濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將GAD65-Ab和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中GAD65-Ab的濃度呈比例關系。

自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人*脫羧酶65抗體ELISA 檢測試劑盒

操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

人*脫羧酶65抗體ELISA 檢測試劑盒

操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

人*脫羧酶65抗體ELISA 檢測試劑盒

結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的GAD65-Ab標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的GAD65-Ab含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-40IU/ml

4、敏感度: 0.1 IU/ml

Iron(II) sulfate, heptahydrate亞鐵七水 [7782-63-0] 500g
Iron(II) sulfate, heptahydrate 亞鐵七水 [7782-63-0] 2.5kg
Iron(II) sulfate, heptahydrate 亞鐵七水 [7782-63-0] 500g
Iron(II) sulfate, heptahydrate 亞鐵七水 [7782-63-0] 100g
Iron(II) sulfate, heptahydrate 亞鐵七水 [7782-63-0] 500g
Iron(II) sulfate, heptahydrate 亞鐵七水 [7782-63-0] 2.5kg
Iron (II) sulfide 硫化鐵 (II) [1317-37-9] 500g
Iron (III) tartrate 酒石酸鐵 [2944-68-5] 500g
Isethionic acid ammonium salt 羥乙基磺酸銨鹽 [57267-78-4] 50g
Isethionic acid sodium salt 羥乙基磺酸鈉鹽 [1562-00-1] 50g
Isoamyl bromide 1-溴代異戊烷 [107-82-4] 250ml
Isobutanol 異丁醇 [78-83-1] 500ml
Isobutyl bromide 溴代異丁烷 [78-77-3] 250ml
Isobutyl chloroformate 氯甲酸異丁酯 [543-27-1] 50ml
3-Isobutyl-1-methylxanthine 3-異丁基-1-甲基黃嘌呤 [28822-58-4] 100mg
Isobutyl vinyl ether 異丁基乙烯醚 [109-53-5] 250ml
Isobutyraldehyde 異丁醛 [78-84-2] 250ml
Isobutyric acid 異丁酸 [79-31-2] 500ml
Isocitrate dehydrogenase 異檸檬酸脫氫酶 / 150U
D-Isoleucine D-異* [319-78-8] 25g
DL-Isoleucine DL-異* [443-79-8] 25g
L-Isoleucine L-異* [73-32-5] 50g
L-Isoleucine L-異* [73-32-5] 250g
L-Isoleucine L-異* [73-32-5] 50g
L-Isoleucine L-異* [73-32-5] 250g
Isonicotinic acid hydrazide 異煙肼 [54-85-3] 100g
Isooctane 異辛烷 [540-84-1] 250ml
Isopentyl alcohol 異戊醇 [123-51-3] 500ml
Isopropanol 異丙醇 [67-63-0] 500ml
Isopropanol 異丙醇 [67-63-0] 500ml
Isopropanolamine 異丙醇胺 [78-96-6] 250ml
Isopropylbenzene 異丙苯 [98-82-8] 100ml
Isopropyl bromide 2-溴丙烷 [75-26-3] 500ml
2-Butanone oxime 甲乙酮肟 [96-29-7] 250ml
2-Isopropylimidazole 2-異丙基咪唑 [36947-68-9] 100g
Isopropyl myristate 十四酸異丙酯 [110-27-0] 250ml
Isovaleraldehyde 異戊醛 [590-86-3] 50ml
Isovaleric acid 異戊酸 [503-74-2] 50ml
Isoxazole 異惡唑 [288-14-2] 100ml
Itaconic acid 衣康酸 [97-65-4] 100g
K-252B 蛋白激酶仰制劑 [99570-78-2] 1mg
Kanamycin sulfate * [25389-94-0] 25g
Kanamycin sulfate * [25389-94-0] 100g
Kanamycin sulfate * [25389-94-0] 5g
Kanamycin sulfate * [25389-94-0] 25g
Kanamycin sulfate * [25389-94-0] 100g
Kanamycin sulfate * [70560-51-9] 5g


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