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北京燕京電子有限公司
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更新時間:2024-05-27 10:09:18瀏覽次數(shù):187次
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細胞培養(yǎng)芯片-BE-TRANSFLOW概述BE-TRANSFLOW是一種用于仿生條件下細胞培養(yǎng)的多功能微流控芯片
細胞培養(yǎng)芯片-BE-TRANSFLOW
概述
BE-TRANSFLOW是一種用于仿生條件下細胞培養(yǎng)的多功能微流控芯片。它允許2D-3D組織培養(yǎng)與建立流動和氣液界面 (ALI)的可能性相結(jié)合。仿生學微型芯片在體外復制不同的組織 結(jié)構(gòu)。 典型應用實例有免疫系統(tǒng)體外模型、腫瘤轉(zhuǎn)移體外模型、 皮膚和腸道芯片模型。
材質(zhì)
BE-TRANSFLOW芯片由生物相容性材料制成,且氣體不滲透,可以有效地梯度控制CO2、O2等。具有良好的光學性能, 具有高透明度和低自熒光。
技術(shù)特點
BE-TRANSFLOW芯片包含兩個獨立的孔,孔底為多孔膜。 多孔膜與底層通道相連。帶有螺旋狀的進口和出口儲液池,用 于連接接頭和毛細管路。防蒸發(fā)儲液池位于培養(yǎng)液儲液池旁邊, 培養(yǎng)期間,毛細管封閉系統(tǒng)之前,將PBS或水灌滿防蒸發(fā)儲液池。
產(chǎn)品經(jīng)過消毒(每盒10片)。常溫(15-25℃)下,避免陽光直射,干燥處存放。
細胞培養(yǎng)涂層
BE-TRANSFLOW芯片經(jīng)過處理,表面親水,便于用水溶液和/或凝膠填充,以促進細胞粘附。
如果需要特定包被涂層,根據(jù)廠家的說明準備涂層溶液(Collagen I, Collagen IV, Fibronectin, Poly-L-Lysine, Poly-D-Lysine…)并應用到每個通道。 吸出涂層溶液,使用通道體積5-10倍的蒸餾水或PBS洗滌,去除多余的涂 層溶液。
填充和處理 1. 對細胞進行裂解和計數(shù)。細胞濃度隨細胞類型而變化。
建議在2-3天內(nèi)接種細胞以獲得融合層。 2. 接種細胞。支持單分子層、水凝膠或兩者同時接種。 2A. 在膜上方的通道中接種細胞。 2B. 在膜下接種單層細胞。將下層通道填滿細胞,并將其翻轉(zhuǎn), 促進細胞附著。如果進行此實驗驗,首先在底層通道中接種細胞, 當細胞成功附著后,翻轉(zhuǎn)芯片并繼續(xù)按照協(xié)議在上面的通道中接 種細胞。 用P-100或P-1000移液管取100 μL帶細胞的培養(yǎng)液,加到進樣口。 培養(yǎng)液通過通道流到出口。注意將進口(1)填滿,出口(2)空出,壓 力差將平衡進口和出口之間的培養(yǎng)液。在防蒸發(fā)儲液池中加水或 PBS以避免蒸發(fā)。
3. 細胞粘附于表面(時間因細胞類型而異)。 4. 如果不連接流體控制系統(tǒng),請在培養(yǎng)液儲液池中添加所需的培養(yǎng) 液。為此,在進口旁邊的培養(yǎng)液儲液池中小心地添加培養(yǎng)液,壓 力差將平衡進口和出口之間的培養(yǎng)液。 5. 如果連接流體控制系統(tǒng),將接頭接在出口和進口(按此順序)。入 口和出口設(shè)計為標準連接(UNF 1/4”- 28)。請記住,在連接設(shè)備和 毛細管之前,須先將儲液池填充。 也可以用搖床把介質(zhì)從一個儲液池移到另一個儲液池。當每個儲液池 的最終體積為100 μl時,可以施加45°傾角。
流體控制系統(tǒng)的配置
Beonchip對流體控制系統(tǒng)的配置提出了一些建議。 前處理: 1. 在培養(yǎng)箱中預熱毛細管和流體控制元件15-20分鐘。 2. 將系統(tǒng)放置在超凈臺中。 3. 在安裝流體控制系統(tǒng)之前,細胞須良好地粘附在表面。
4. 芯片內(nèi)部或入口/出口需要填充滿培養(yǎng)液。 組裝流體控制系統(tǒng),需考慮以下事項: 1. 將入口填滿培養(yǎng)液,防止有氣泡殘留。 2. 在組裝系統(tǒng)之前,先將連接到入口的毛細管準備好。 3. 入口和出口都連接標準接頭(UNF 1/4”- 28)。當系統(tǒng)準備好,將接 頭連接在進口。過程中須非常小心,以確保沒有氣泡進入系統(tǒng)。 4. 將毛細管連接到出口,封閉系統(tǒng)。 5. 檢查系統(tǒng)是否有泄漏。在將系統(tǒng)放入生物反應柜或培養(yǎng)箱之前, 讓泵運行幾分鐘。 注意:為防止過程中產(chǎn)生氣泡,請避免將移液管倒空。當從吸液口移開 移液管時,緊緊握住柱塞,以免負壓將溶液吸走。 細胞接種 下面是應用實例,以便更好地理解該芯片。 芯片可以進行單培養(yǎng)或共培養(yǎng)。在膜上和/或下接種不同類型的細胞 單分子層(1和2)。為了更實際的分析,可以在膜上添加水凝膠細胞培養(yǎng)物 (3)。
細胞顯微觀察的準備
可監(jiān)測固定的或活的細胞和化學梯度。傳統(tǒng)細胞培養(yǎng)中使用的大多數(shù) 監(jiān)測系統(tǒng)都可以用于BEONCHIP微流控芯片。常用的固定物也可用。細胞活力可以用不同的染料來評估。此外,免疫熒光染色可識別特異性靶點。 細胞周期熒光記錄儀也可以使用。
其他讀數(shù) 可以復蘇細胞,以便進行下游應用,如流式細胞,RNA提取(PCR)… 欲了解更多信息,請聯(lián)系BEC。
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