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細胞培養(yǎng)芯片-BE-FLOW

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更新時間：2024-05-27 10:06:59瀏覽次數(shù)：349次

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產(chǎn)品簡介

細胞培養(yǎng)芯片-BE-FLOW概述BE-FLOW是一種用于仿生條件下細胞培養(yǎng)的多功能微流控芯片

詳細介紹

細胞培養(yǎng)芯片-BE-FLOW

概述

BE-FLOW是一種用于仿生條件下細胞培養(yǎng)的多功能微流控芯片。它能在體外模擬流動和剪切應力的生理環(huán)境。在流動條件下，實現(xiàn)在兩個獨立通道中進行長期的2D或3D實驗。典型應用實例包括細胞粘附到血管內(nèi)皮的過程(感染、細胞治療、轉移等)。

材質(zhì)

BE-FLOW芯片由生物相容性材料制成，且氣體不滲透，可以有效地梯度控制CO2、O2等。具有良好的光學性能，具有高透明度和低自熒光。

技術特點

BE-FLOW包括2個獨立的通道，帶有螺旋狀的進口和出口儲液池，用于連接接頭和毛細管路。防蒸發(fā)儲液池位于培養(yǎng)液儲液池旁邊，培養(yǎng)期間，毛細管封閉系統(tǒng)之前，將PBS或水灌滿防蒸發(fā)儲液池。

產(chǎn)品經(jīng)過消毒(每盒10片)。常溫(15-25℃)下，避免陽光直射，干燥處存放。

細胞培養(yǎng)涂層

BE-FLOW芯片經(jīng)過處理，表面親水，便于用水溶液和/或凝膠填充，以促進細胞粘附。如果需要特定包被涂層，根據(jù)廠家的說明準備涂層溶液(Collagen I, Collagen IV, Fibronectin, Poly-L-Lysine, Poly-D-Lysine…)并應用到每個通道。吸出涂層溶液，使用通道體積5-10倍的蒸餾水或PBS洗滌，去除多余的涂層溶液。

填充和處理

1. 對細胞進行裂解和計數(shù)。細胞濃度隨細胞類型而變化。建議在2-3天內(nèi)接種細胞以獲得融合層。 2. 用P-100或P-1000移液管取100 μL帶細胞的培養(yǎng)液，加到進樣口。讓培養(yǎng)液通過通道流到出口。在防蒸發(fā)儲液池中加水或PBS以避免蒸發(fā)。 3. 細胞粘附于表面(時間因細胞類型而異)。 4. 如果不連接流體控制系統(tǒng)，請在培養(yǎng)液儲液池中添加所需的培養(yǎng) 液。為此，在進口旁邊的培養(yǎng)液儲液池中小心地添加培養(yǎng)液，壓力差將平衡進口和出口之間的培養(yǎng)液。 5. 如果連接流體控制系統(tǒng)，將接頭分別接在出口和進口(按此順序)。入口和出口設計為標準連接(UNF 1/4”- 28)。請記住，在連接設備和毛細管之前，須先將儲液池填充。也可以用搖床把介質(zhì)從一個儲液池移到另一個儲液池。當每個儲液池的最終體積為100 μl時，可以施加45°傾角。

流體控制系統(tǒng)的配置

Beonchip對流體控制系統(tǒng)的配置提出了一些建議。

前處理:

1. 在培養(yǎng)箱中預熱毛細管和流體控制元件15-20分鐘。

2. 將系統(tǒng)放置在超凈臺中。

3. 在安裝流體控制系統(tǒng)之前，細胞須良好地粘附在表面。

4. 芯片內(nèi)部或入口/出口需要填充滿培養(yǎng)液。

組裝流體控制系統(tǒng)，需考慮以下事項:

1. 將入口填滿培養(yǎng)液，防止有氣泡殘留。

2. 在組裝系統(tǒng)之前，先將連接到入口的毛細管準備好。

3. 入口和出口都連接標準接頭(UNF 1/4”- 28)。當系統(tǒng)準備好，將接頭連接在進口。過程中須非常小心，以確保沒有氣泡進入系統(tǒng)。

4. 將毛細管連接到出口，封閉系統(tǒng)。

5. 檢查系統(tǒng)是否有泄漏。在將系統(tǒng)放入生物反應柜或培養(yǎng)箱之前，讓泵運行幾分鐘。注意：為防止過程中產(chǎn)生氣泡，請避免將移液管倒空。當從吸液口移開移液管時，緊緊握住柱塞，以免負壓將溶液吸走。

細胞接種

血液動力學與血管內(nèi)皮的相互作用是心血管功能中需要考慮的重要因素。來自動脈血管內(nèi)壁的血管內(nèi)皮細胞暴露在血液流中，血液流作為切向力(切應力)作用于內(nèi)皮細胞表面。在機械刺激下，細胞可以通過機械轉導過程調(diào)節(jié)多種生物反應。BE-FLOW由兩個獨立的通道組成。每個通道都有一個入口和出口儲液池，可以與一個流體控制系統(tǒng)連接，模擬血管的框架。在ECM涂覆表面上接種內(nèi)皮細胞，以滿足細胞類型對生長和粘附的特定需求，使在不同的生理和病理流速下重建一個動態(tài)環(huán)境成為可能。

細胞顯微觀察的準備可監(jiān)測固定的或活的細胞和化學梯度。傳統(tǒng)細胞培養(yǎng)中使用的大多數(shù) 監(jiān)測系統(tǒng)都可以用于BEONCHIP微流控芯片。常用的固定物也可用。細胞活力可以用不同的染料來評估。此外，免疫熒光染色可識別特異性靶點。細胞周期熒光記錄儀也可以使用。其他讀數(shù) 可以復蘇細胞，以便進行下游應用，如流式細胞術，RNA提取 (PCR)… 欲了解更多信息，請聯(lián)系BEC。