質粒載體網擁有強大的包含質粒載體、細胞、微生物菌種、培養基等相關產品信息在線查詢功能,能根據不同屬性進行需求產品的篩選功能,可以在線訂購已設計入庫的質粒載體!“打造平臺,創造質粒大數據共享"是網站的業務主旨!質粒載體網永遠歡迎您的造訪!
產品名稱:HCC1187細胞;人乳腺導管癌細胞
細胞數量:1*10^6
組織來源:人乳腺導管
細胞種屬:人源
生長特性:半懸浮半貼壁
培養基:RPMI-1640
形態特征:上皮樣
傳代方法:1:2-
培養條件:胎牛血清至最終濃度為10%。環境:空氣,95%;二氧化碳(CO2),5%;溫度,37℃
細胞描述:該細胞系于1994年9月13日從已接受過化,療的患者開始。細胞系耗時4.5個月建立
細胞凍存:液氮凍存(凍存液基礎培養基+20%FBS+10%DMSO)
細胞運輸:干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25瓶)
注意事項
凍存細胞接收后的處理:
1.干冰運輸,收到細胞后立即轉入-80℃冰箱短暫中轉或直接復蘇;
2.收到細胞后,若發現干冰已經完,全揮發、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯系。
復蘇細胞接收后的處理:
1.收到細胞后,請首先檢查培養瓶是否破損或漏液,培養液是否混濁,如有漏液及培養液混濁情況請立即拍照把圖片發給我們。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養箱中靜置4-6h后,在顯微鏡下確認細胞狀態并拍照100倍和200倍的照片,若有貼壁細胞脫落,可收集上清離心,將沉淀用新的培養基接種至新的培養瓶或培養皿中。
3.建議收到當天不要消化處理,如果細胞長滿90%,可選擇傳代處理。
4.如您收到細胞3天內沒有反饋相關問題,出現的細胞問題將不提供免費重發服務。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰,酶(T25瓶),使胰,酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完,全培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰,蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完,全培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。