尿素氮（BUN）含量檢測試劑 盒 微量法說明書

注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

貨號：YX-W-A812 

規(guī)格：100T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：粉劑×2瓶，4℃避光保存，臨用前加2mL蒸餾水充分溶解。

 試劑二：液體6mL×1瓶，4℃保存。

試劑三A 液：液體 0.4mL×1 支，4℃保存；

試劑三B 液：液體1.6mL×1 瓶，4℃保存；臨用前將A 液倒入B 液中混合，或者根據(jù)比例（A:B=1:4）現(xiàn)用現(xiàn)配；

試劑四：液體 2mL×1 瓶，4℃避光保存。

標準品：粉劑×1 瓶，4℃保存。10mg 尿素。臨用前加入 4.66mL 蒸餾水配制成 1mg/mL 尿素氮標準液。

產(chǎn)品說明：

尿素（BUN）是人體蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物，BUN構成了血液中絕大部分的非蛋白質(zhì)氮， 血液尿素氮是腎功能的主要指標之一。用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N，生成的藍色靛酚和尿素氮的濃度成正比

尿素氮（BUN）含量檢測試劑盒自備實驗用品及儀器：

可見分光光度計/酶標儀、天平、研缽/勻漿器、低溫離心機、微量玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

操作步驟：

 一、樣品處理

1.組織：按照質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為 1：5-10  的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL蒸餾水），冰上勻漿后于4℃，13000g 離心15min，取上清待測。
2.細胞：按照細胞數(shù)量（104個）：蒸餾水體積（mL）為500-1000：1 的比例（建議500萬個細胞加入1mL 蒸餾水），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3 s，間隔7 s，總時間3min）；然后4℃，13000g 離心15min，取上清置于冰上待測。
3.血清（漿）或其它液體：直接檢測。

二、測定操作：
1 、分光光度計/酶標儀預熱 30min，波長調(diào)至 630nm，分光光度計蒸餾水調(diào)零。

2、將 1mg/mL 尿素氮標準液用蒸餾水稀釋至 50μg/mL 備用。

 3、加樣表：

尿素氮（BUN）含量檢測試劑盒三、計算公式：
1. 按樣本質(zhì)量計算：
尿素氮含量（μg/g）= ΔA測定÷ΔA標準×C標準品×V提取÷W
=50×ΔA測定÷ΔA標準÷W。
2. 按蛋白濃度計算：
尿素氮含量（μg/mg prot）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準品×V提取÷（Cpr×V提取）
=50×ΔA測定÷ΔA標準÷Cpr。
3. 按細胞數(shù)計算：
尿素氮含量（μg/104 cell）= ΔA測定÷ΔA標準×C標準品×V提取÷細胞數(shù)量
=50×ΔA測定÷ΔA標準÷細胞數(shù)量。
4. 按液體體積計算：
尿素氮含量（mg/mL）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準品
=50×ΔA測定÷ΔA標準。
C標準品：標準品濃度，50μg/mL；V提取：提取液體積，1mL；W：樣品質(zhì)量，g；Cpr：樣品蛋白濃度，mg/mL；細胞數(shù)量：以萬計。
尿素氮（BUN）含量檢測試劑盒注意事項：
1. 配制好的試劑一在2-8℃條件下可保存一周。
2. ΔA測定大于1或者A測定管大于1時，建 議將樣品用蒸餾水稀釋后 在進行測定。