規格及成分:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
數據采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器*的流程進行。本產品中所含的熒光染料在不結合DNA 時,大吸收光譜在 471nm,結合 DNA 時的大吸收光譜在 500nm,大發射光譜在 530nm。
數據處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
產品名稱:甲型流感病毒(IAV)核酸檢測試劑盒供應商
規格:48T/盒
編號:BH-P4645
分類:熒光-PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
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規格及成分:
產品名稱成 分 編 號 十孔盒包裝
MMLV 逆轉錄酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀劑 50903 400 μL
TdT(末端轉移酶) 120312 10 μL
2×TdT Buffer(含 dATP) 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0(含染料) 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手冊 101105sc 1 份
TF Others Sus scrofa (Pig) 野豬 ansferrin / TF 人細胞裂解液 (陽性對照) *(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品Gabexate mesylate
大鼠雪旺氏細胞*培養基 100mL地塞米,氟美質量規格:>99%,BR,可用于細胞培養Dexamethasone
UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細胞 UMNSAH/DF-1 chicken embryo fibroblast DMEM培養基+10%FBS*(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品(S)-Carbidopa
IFNW1 Protein Human 重組人 Ierferon omega-1 / IFNω / IFNW1 蛋白 (Fc 標簽)*(標準品)質量規格:>98%,標準品Chlormadinone Acetate
NCI-H209(人小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 MRC-5(胚肺細胞)*質量規格:>98%Chlormadinone Acetate
人肺成纖維細胞 (HPF)( 5×105 )槲皮素-7-O-葡萄糖苷(標準品)Quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside質量規格:HPLC≥98%,標準品
CL-0277HCC94(人子宮鱗癌細胞(高分化))5×106cells/瓶×2花椒毒酚(標準品)Xanthotol質量規格:HPLC≥98%,標準品
人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292 大鼠表皮色素細胞*培養基 100mL槐果堿(標準品)Sophocarpine質量規格:HPLC≥98%,標準品
MFC 小鼠胃癌細胞環氧澤瀉1(標準品)Alismoxide質量規格:HPLC≥98%,標準品
TFRC Others Human 人 TFRC / CD71 人細胞裂解液 (陽性對照) 黃柏堿(標準品)Phellodendrine質量規格:HPLC≥98%,標準品
甲型流感病毒(IAV)核酸檢測試劑盒供應商小鼠腹脊髓神經元MN-vsc癸酸*酯質量規格:Cholesterol Decanoate
CD3D Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3d / CD3 delta 人細胞裂解液 (陽性對照) 氫化肉桂酸*酯(>95.0%(GC))質量規格:>95.0%(GC)Cholesterol Hydrocinnamate
大鼠淋巴管內皮細胞*培養基 100mL月桂酸*酯(>95.0%(GC))質量規格:>95.0%(GC)Cholesterol Laurate
HCC-LM3人肝癌細胞 HCC-LM3 human hepatocarcinoma cells DMEM+10%FBS豆蔻酸*酯(>98.0%(T))質量規格:>98.0%(T)Cholesterol Myristate
LRIG1 Protein Mouse 重組小鼠 LRIG1 / LIG-1 蛋白 (His 標簽)番瀉苷C(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Sennoside C
注意事項:
①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。