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閱讀:590發(fā)布時(shí)間:2020-8-26
胎盤(pán)生長(zhǎng)因子試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟:
1:留意試劑盒保存期,過(guò)保存期的試劑不能運(yùn)用。
2:評(píng)價(jià)試劑的實(shí)用性,試劑的穩(wěn)定與否,對(duì)率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽(yáng)對(duì)照及樣品重復(fù)對(duì)比實(shí)驗(yàn),斷定試劑符合要求后方可運(yùn)用。
3:嚴(yán)厲把握顯色時(shí)刻,顯色時(shí)刻過(guò)短,參加胎盤(pán)生長(zhǎng)因子試劑盒停止液反應(yīng)停止后,底物結(jié)合物的量過(guò)少,易呈現(xiàn)假陰性。超過(guò)顯色要求時(shí)刻后顯色,應(yīng)判為假陽(yáng)性,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后當(dāng)即顯色,不行報(bào)陽(yáng)性,這可能是本底顯色的成果。
4:加樣要、快速。如果加樣不,酶生成物的量不能斷定,直接影響顯色成果。顯色的深淺及A值的測(cè)定與參加顯色劑和停止液的量胎盤(pán)生長(zhǎng)因子試劑盒有關(guān),所以加樣應(yīng)穩(wěn)重。要求在必定時(shí)刻內(nèi)加樣結(jié)束的實(shí)驗(yàn),如果加樣緩慢,便呈現(xiàn)差錯(cuò),并且試劑長(zhǎng)時(shí)刻暴露在外,特別室溫過(guò)高時(shí),保存期會(huì)縮短乃至失效。
5:檢驗(yàn)技師應(yīng)具有從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能嫻熟操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有必定總結(jié)和剖析問(wèn)題的才干,對(duì)實(shí)驗(yàn)中呈現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。
6:運(yùn)用校對(duì)過(guò)的微量移液器,掃除自然差錯(cuò)。移液器與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。
7:仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),嚴(yán)厲依照說(shuō)明書(shū)胎盤(pán)生長(zhǎng)因子試劑盒要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不行混用。值得改善的當(dāng)?shù)兀貜?fù)實(shí)驗(yàn)斷定建立后才干改善。
8:洗刷*,如若洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性。洗刷液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳腐的洗刷液會(huì)呈現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能呈現(xiàn)假陽(yáng)性。
9:嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)刻,反應(yīng)時(shí)刻過(guò)長(zhǎng),酶失活;反應(yīng)時(shí)刻過(guò)短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松懈胎盤(pán)生長(zhǎng)因子試劑盒不結(jié)實(shí),容易洗掉,都可能造成假陰性。
胎盤(pán)生長(zhǎng)因子試劑盒原理:
胎盤(pán)生長(zhǎng)因子試劑盒基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面胎盤(pán)生長(zhǎng)因子試劑盒的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物胎盤(pán)生長(zhǎng)因子試劑盒被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。
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