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古朵小課堂:收集血漿樣本需添加的抗凝劑
做ELISA實驗收集血漿樣本時為什么要加抗凝劑?顧名思義,抗凝劑就是為了防止血液凝固的。加了抗凝劑后,血液在一定的時間內會保持原來的物理化學狀態。如果沒加抗凝劑,血漿是凝聚在一起的,不好測定。常見的抗凝劑有哪些呢?今天古朵生物技術小編就為您詳細總結如下:
1、乙二胺四乙酸(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid,EDTA)鹽
常用有鈉鹽或鉀鹽,能與血液中鈣離子結合成螯合物,使Ca2+失去凝血作用,阻止血液凝固。
特點:對血細胞形態、血小板計數影響很小(但影響血小板聚集)。不適于凝血檢查、血小板功能試驗。
根據血液學標準化委員會(International Committee for Standardization of hematology , ICSH ) 1993年文件建議,血細胞計數用EDTA-K2作抗凝劑(EDTA-K2-2H2O 1.5~2.2mg/ml血液)。
2、草酸鹽
常用有草酸鈉、草酸鉀、草酸銨,溶解后解離的草酸根離子能與樣本中鈣離子形成草酸鈣沉淀,使Ca2+失去凝血作用,阻止血液凝固。2mg草酸鹽可抗凝lml血液。但不適于凝血檢查。而且,草酸鹽濃度過高還會導致溶血、改變血液pH,干擾血漿鉀、鈉、氯和某些酶活性的測定。
雙草酸鹽抗凝劑:適用于血細胞比容、CBC、網織紅細胞計數等檢查,不適于血小板計數、白細胞分類計數。
3、肝素
有加強抗lnmⅢ(AT-Ⅲ)滅活sns蛋白酶,阻止的形成,并阻止血小板聚集等作用,從而阻止血液凝固。肝素是紅細胞透滲脆性試驗的理想抗凝劑。但不適于CBC、細胞形態學檢查。每毫升血液肝素用量為(15±2.5)U,多為肝素n鹽或鉀鹽。
4、枸櫞酸鹽
常用的有g,能與血液中鈣離子結合形成螯合物,阻止血液凝固。枸櫞酸鹽抗凝劑的抗凝力不如上述抗凝劑。g櫞酸鈉與血液的抗凝比例為l:9或1:4。適用于紅細胞沉降率、凝血檢查,是輸血保養液的成分。
以上就是收集血漿樣本要添加的一些抗凝劑種類,當然還有其他的抗凝劑,大家可以根據實驗需要來進行選擇。
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