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阻斷ELISA與液相阻斷ELISA有什么區(qū)別
一、本質(zhì)不同:
間接的酶標(biāo)抗體是二抗,與待檢抗體結(jié)合;阻斷酶標(biāo)抗體是一抗,與抗原結(jié)合。間接中底物降解的量與抗體量相等,阻斷底物降解量與抗體。
二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同:
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (以下簡(jiǎn)稱ELISA) :是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用*的技術(shù),其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 ) 表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除,常用的ELISA法有雙抗體夾心法和間接法。
OD值不同是因?yàn)榍昂髽右旱臐舛炔煌酝腹饴室膊灰粯樱乔昂蟮腛D值都是表示同一種物質(zhì)在不同濃度時(shí)的OD值,只是相對(duì)在0.2-0.8范圍內(nèi)比較精確而已。
三、用途不同:
ELISA更為簡(jiǎn)便實(shí)用和標(biāo)準(zhǔn)化,從而使其成為*泛應(yīng)用的檢測(cè)方法之一,目前ELISA方法已被廣泛應(yīng)用于多種細(xì)菌和病毒等疾病的診斷,在動(dòng)物檢疫方面,ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽狂犬病、藍(lán)舌病等的診斷中已為廣泛采用的標(biāo)準(zhǔn)方法。
用于標(biāo)記的酶 用于標(biāo)記抗體或抗抗體的酶須具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室溫下穩(wěn)定;反應(yīng)產(chǎn)物易于顯現(xiàn);能商品化生產(chǎn)。目前應(yīng)用較多的有辣根過(guò)氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP應(yīng)用*。
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