不論是對活體還是體外培養的哺乳動物細胞，慢病毒表達載體對遺傳物質的轉導效率至關重要。慢病毒早起源于人免疫缺陷病毒 （HIV） 或貓免疫缺陷病毒（FIV），能夠感染幾乎所有類型的細胞，包括難以用質粒轉染甚至無法用質粒轉染的細胞。

許多客戶對如何用慢病毒顆粒進行轉導持有疑問，特別是對如何選擇適合的慢病毒量感到困惑。這個問題可根據確定細胞的感染復數（Multiplicity of Infection, MOI）來解決。

什么是 MOI？
選購慢病毒顆粒之前，首先需了解目的細胞的感染復數：MOI。MOI 的概念很簡單，可有效感染細胞的慢病毒顆粒數與被感染細胞數的比值即為該細胞的 MOI 值。

例如，應用 106 TU 慢病毒感染 106 個細胞可成功使 80% 以上細胞達到轉導目的時，MOI=1；如需要以 5 × 106 TU 病毒才可成功感染 106 個細胞，則 MOI = 5。（TU/mL 為慢病毒滴度單位，TU 表示有活性的慢病毒量）

如何確定目的細胞的 MOI 值？
慢病毒對不同類型細胞的轉導效率各不相同，因此 MOI 也各異。在此，我們列出了多種常用細胞系的 MOI，助您選購合適的慢病毒量。下表是 GeneCopoeia 通過實驗摸索得出的多種細胞系的 MOI 參考值。

了解慢病毒滴度是獲得 MOI 的前提條件。根據上表，若您的實驗對象是ru腺癌細胞系 MCF-7，其 MOI 參考值= 2，那么當您購買了 50μL 的慢病毒顆粒（滴度是 108 TU/mL）時，您得到的慢病毒總量為 5×106TU。在 MOI= 2 的條件下，您所購買的慢病毒足夠轉導 MCF-7 在 24 孔板中鋪板培養的其中 5 孔（約合 4×105 細胞/孔）。若您的目的細胞系 MOI 要求較高，您需要購買或自行包裝更多慢病毒顆粒。

請注意：
上表所示的 MOI 值僅供您選購慢病毒時作為用量參考。根據細胞狀態、操作手法等的差別，實際數據可能有輕微浮動。所以當您收到所購買的慢病毒時，我們仍然建議您通過設計梯度 MOI 感染小量細胞實驗（如：MOI = 0.3, 1, 3, 5, 10, etc.）檢測目的細胞的轉導效率，確認其 MOI 值。另外，若您的實驗細胞未被列在上表中，梯度實驗確定 MOI 是至關重要，甚至*的。您可將病毒進行梯度稀釋，分別感染等量的細胞。

進行轉導的 1 天前，于 96 孔板鋪板培養目的細胞 （實例中使用了 H1299 細胞）；在進行轉導當天，以 10 倍梯度稀釋慢病毒并分別進行轉導；轉導 72 小時后以熒光顯微鏡觀察 GFP 報告基因表達情況，確定該細胞在轉導效果下的慢病毒量。

后，若您的實驗細胞要求較高的 MOI 值， 您還可通過以下幾種方法將其降低。方法一是加入 polybrene （hexadimethrine bromide）， 一種能夠減少病毒與細胞膜間電荷排斥作用的陽離子聚合物。另一種方法是使用能夠捕獲慢病毒顆粒的磁珠（例如，利用磁珠可成功地將 MM-AN 細胞的 MOI 從 16 降到 4）。購買或構建克隆時，可選擇載體骨架上帶有標記基因（如：Puromycin, Neomycin 等）的克隆，可方便后續進行藥物篩選，建立將目的基因成功地隨機整合到特定細胞的穩定細胞株。

GeneCopoeia 提供基于慢病毒表達載體的人源及小鼠源的 ORF, 啟動子，shRNA, pre-miRNA, microRNA inhibitor, 以及 CRISPR sgRNA 表達克?。ㄙ|粒）。另外，我們還提供慢病毒包裝服務、LentiFectTM 慢病毒包裝試劑盒（包含滴度增強劑），慢病毒濃縮試劑和 EndofectinTM 轉染試劑等，實現一站式慢病毒解決方案。