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高效液相色譜法和核磁共振譜法的優(yōu)缺點分析
閱讀：184 發(fā)布時間：2024-11-15NMR是測定分子結(jié)構(gòu)的的方法之一，具有簡單、準(zhǔn)確、專一性高和不破壞樣品等特點。不僅已被用以定量測定大量的藥理活性藥物，還能區(qū)分及定量測定一些藥物的立體異構(gòu)體。表明此方法作為一種藥物的定量方法具有簡單易行、結(jié)果準(zhǔn)確的優(yōu)點，還可用做某些沒有對照品的藥物定量方法的補(bǔ)充。
NMR與HPLC、GC、SFE、SFC、GPC、CE等的聯(lián)用使快速高效分離與強(qiáng)有力結(jié)構(gòu)分析有機(jī)的結(jié)合。而HPLC與NMR的聯(lián)用設(shè)想則早始于20世紀(jì)70年代，80年代初布魯克公司就以其世界的NMR技術(shù)為基礎(chǔ)，首先開發(fā)了LC／NMR技術(shù)。近年來，NMR和色譜法聯(lián)合使用的這一技術(shù)更為成熟，經(jīng)過不斷改進(jìn)和完善，全自動操作、常規(guī)使用的HPLC／NMR譜儀已遍及，液相色譜是分離復(fù)雜混合物的最好方法，而NMR是結(jié)構(gòu)分析強(qiáng)有力的工具，兩者聯(lián)用是科學(xué)家們長期以來的愿望。
典型的高效液相色譜與核磁共振聯(lián)用儀。液相色譜包括：HPLC自動進(jìn)樣器，HPLC泵，色譜柱和恒溫箱，非NMR檢測器，如UV(紫外一可見)等。流動液從檢測器進(jìn)入HPLC／NMR接口，接口中附設(shè)了用于中間存儲HPLC峰的環(huán)路(LOOP)，從HPLC／NMR接口出來引至帶流動池的NMR探頭或廢液收集器。通過探頭后，流動液進(jìn)入餾分收集器回收，并進(jìn)一步用各種NMR技術(shù)對各色譜峰進(jìn)行研究。在HPLC與NMR接口處的分流器(splitter)上還可連接質(zhì)譜儀，進(jìn)一步成為LC—NMR／MS聯(lián)用儀。
HPLC／NMR的基本操作模式有連續(xù)流動模式(on - flow)、停流模式(stop—flow)和峰存貯模式(Peak parking or loop—collection)等三種。這三種模式各有特點，如連續(xù)流動模式的優(yōu)點是一次分析可得到所有組分的NMR信息，缺點是所獲得的NMR圖譜質(zhì)量較差；停流模式的優(yōu)點是NMR譜圖質(zhì)量較好，缺點是存在明顯的峰展寬，而且分析時間較長；峰存貯模式的特點是色譜峰被收集并暫時貯存到不同的毛細(xì)管回路內(nèi)，由NMR譜儀逐一測定各流分。實際操作時，根據(jù)樣品的特性和檢測目的，可選擇采用何種操作模式。
采用HPLC／NMR方法可對雜質(zhì)含量在9％水平的藥物雜質(zhì)進(jìn)行檢測，方法簡便、快速、準(zhǔn)確。在藥物雜質(zhì)檢測中，HPLC／MS測定和HPLC／NMR測定都是簡便、快速的方法，但HPLC／NMR聯(lián)用技術(shù)中NMR測定不受HPLC分離過程中使用的緩沖鹽溶液的限制，并可以提供大量的結(jié)構(gòu)信息。因此，HPLC／NMR聯(lián)用技術(shù)是一種高效、快速獲得混合物中術(shù)知化合物結(jié)構(gòu)信息的技術(shù)，它在藥物研究中的應(yīng)用已日益廣泛。