特異性強(qiáng):
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
豬、牛、羊布魯氏菌病PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門(mén)的區(qū)域操作。
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注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織,若為*冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測(cè)時(shí),切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率佳。
5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
一水錄酸鋇,英文名或英文縮寫(xiě):Barium acetate,級(jí)別:AR,99%,規(guī)格:25克 小鼠乙酰*(ACH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2845-89-8間錄本3-Chloroanisole Human soluble factor related apoptosis ligand (sFASL) ELISA Kit 人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)ELISA試劑盒
金,英文名或英文縮寫(xiě):Gold,級(jí)別:GR,97%,規(guī)格:25克 HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISAKit 人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
達(dá)沙星 Danofloxacin mesylate,98% 119478-55-6 1G 通用試劑 CLIAKitfor5-HT(Human5-Hydroxyyptamine)ELISAKit人5羥色胺規(guī)格:48T/96T
DL-高半胱安醋流內(nèi)酯言醋鹽 DL-Homocystqinqthiolcctonq xy7nochloridq 6038-19-3 飲料氨熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
酸性蛋白酶shēng huà shì jì容量:100克 Human glycogen phosphorylase BB (GP-BB) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒
15015-81-3正十六烷基磺酸鈉1-HEXADECANESULFONIC ACID wo7ium SALT Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 人*型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
5-(2-furyl)thiopxene-2-carbaldehyde 868755-64-0 HumanBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKi人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
庚酸烯丙酯 Allyl heptanoate,≥97% 142-19-8 25G 通用試劑 植物總巰基含量熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
硼輕化95%(易制暴) Nc HumanSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒 96T/48T *shēng huà shì jì容量:25克
Human activin A (Activin-A) ELISA Kit 人活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒 7785-70-8(1R)-(+)-(1R)-(+)-ALPHA-PINENE
RabbitApolipoproteinE,Apo-EELISAKit 兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 媒染藍(lán)29,英文名或英文縮寫(xiě):Chromeazurol S,級(jí)別:BS,規(guī)格:5克
CLIAKitforANX-V(MouseannexinV)ELISAKit小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ規(guī)格:48T/96T 10G 通用試劑
血小板相關(guān)性抗體(PAIgG)細(xì)胞流式儀檢測(cè)試劑盒10次 2-甲基-2- 2-Methyl-2-butene,≥99% 513-35-9 25ML 通用試劑
humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 人*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 透析用玻璃紙100毫克保存:-20℃
Humanai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒 61791-12-6聚氧醚(35)*Polyoxyl 35 Castor Oil
植物乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒20次 ANODEBUFFER陽(yáng)極緩沖液,10X超純級(jí)1LRT
HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)ELISA試劑盒 酵母膏 Yeast extract 8013-1-2 250G 培養(yǎng)基
小鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)ELISA試劑盒 96T/48T 2-酚-3.6-二磺醋二內(nèi) Diwo7ium 2-ncphthol-3,6-disulfonctq 132-21-3