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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間：2018-04-24 09:41:01瀏覽次數(shù)：305次
聯(lián)系我時，請告知來自 智慧城市網(wǎng)大鼠骨骼肌成肌細胞；L6價格冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
大鼠骨骼肌成肌細胞；L6價格冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
細胞名稱 大鼠骨骼肌成肌細胞；L6價格
形態(tài)特性 成肌細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 L6成肌細胞株是Yaffe從甲基膽蒽存在下大鼠大腿肌的原代培養(yǎng)物zui初兩代中分離得到。 L6細胞在培養(yǎng)基中融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維。 細胞融合的程度隨著代數(shù)的增加而下降，因而細胞應冷凍于低代次階段并周期性地重新克隆以選擇融合能力強的細胞。 如果讓培養(yǎng)容器中的細胞長滿，這株細胞的成肌組分將迅速耗盡。 檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H：
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 
復蘇操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗
注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研，不得用于臨床應用。
公司是*的ATCC細胞供應商，提供的報價，咨詢，稱技術服務，咨詢選購。
Human Collectin ELISA Kit 人膠原凝集素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-SMC1 染色體結構維持蛋白質1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat anti-Rabbit IgG whole serum 羊抗兔IgG抗血清 規(guī)格 1ml
PCNA ELISA Kit 大鼠抗增殖細胞核抗原抗體 96T
NUPR1 英文名稱： 核蛋白p8抗體 0.1ml
BAIAP2L2 英文名稱： BAIAP2L2蛋白抗體 0.1ml
Anti-SMC1 染色體結構維持蛋白質1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SHBG(Human sex hormone-binding globulin) ELISA Kit 人性激素結合球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-LKB1(Thr363) 磷酸化*/*蛋白激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KLHL36/C16orf44 Kelch樣蛋白36抗體 規(guī)格 0.2ml
Cav-1 ELISA Kit 大鼠窖蛋白Caveolin1 96T
Prohibitin 英文名稱： 抑制素/抑制因子抗體 0.1ml
CDO1 英文名稱： 半胱酸雙加氧酶1抗體 0.2ml
Anti-phospho-LKB1(Thr363) 磷酸化*/*蛋白激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti-KLK14/FITC 熒光素標記*14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC 熒光素標記磷酸化SMAD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALG11 天*連接糖基化11抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗人IgG 0.1ml
GRB 14 英文名稱： 生長因子受體結合蛋白14抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC 熒光素標記磷酸化SMAD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠的血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit 大鼠的血清白蛋白殘留檢測Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-VAP1 血管粘附蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh GATA-3 GATA結合蛋白3抗體 規(guī)格 0.1ml
BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 人腦源性神經營養(yǎng)因子 96T
phospho-NF1(Ser2817) 英文名稱： 磷酸化1型神經纖維瘤抗體 0.1ml
ARHGAP32 英文名稱： Rho GTP酶激活蛋白32抗體 0.2ml
Anti-VAP1 血管粘附蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
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