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上海撫生實業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2018-04-20 11:50:57瀏覽次數(shù):111次
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小鼠雜交瘤細胞;10F7品牌冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;10F7品牌
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
公司是*的ATCC細胞供應商,提供小鼠雜交瘤細胞;10F7品牌的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。
復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
Anti-Phospho-MARCKS (Ser162) /FITC 熒光素標記磷酸化*蛋白激酶C底物Marcks抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TFR/CD71/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAM20 去整合素樣金屬蛋白酶20抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgG/APC APC標記的兔抗雞IgG 0.1ml
GAS8 英文名稱: 生長停滯特異性蛋白8抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Bovine IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗IgM 規(guī)格 0.1ml
Anti-TFR/CD71/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ITAC/CXCL11(Human Interferon inducible T-cell Chemoattractant) ELISA Kit 人干擾素誘導T細胞趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GAPDH 3-磷酸甘油醛脫氫酶(兔來源免疫組化用抗體)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-CY5 PE-CY5標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格 0.1ml
H2-K1(Human Histocompatibility 2-K1-K region) ELISA Kit 人組織相容性2-K1-K 區(qū) 96T
RYBP 英文名稱: 凋亡相關蛋白1抗體 0.2ml
ICAM1 英文名稱: 細胞間粘附分子-1抗體 0.1ml
Anti-GAPDH 3-磷酸甘油醛脫氫酶(兔來源免疫組化用抗體)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-STAT4 /FITC 熒光素標記信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
GFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
蛋白激酶A抗體 Anti-PKA 0.1ml
Salmonella enteritidis H 英文名稱: 傷*鞭毛抗原H抗體 0.2ml
ETS1 英文名稱: Ets轉(zhuǎn)錄因子家族ets1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-MYF5 (phospho Ser49) 磷酸化生肌決定因子Myf5抗體 規(guī)格 0.1ml
GFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Tyrosinase *酶(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD337/NKp30/NCR3 細胞毒性受體NK-p30抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Orexin-A 增食欲素A/欲激素A 規(guī)格 0.1ml
CD300C Kit Human 人 CD300C ELISA配對抗體 ELISA
TRAF4 英文名稱: 壞死因子受體相關蛋白4抗體 0.1ml
C1orf98 英文名稱: 1號染色體開放閱讀框98抗體 0.2ml
Anti-CD337/NKp30/NCR3 細胞毒性受體NK-p30抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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