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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2018-04-18 09:34:32瀏覽次數(shù):215次
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小鼠胚胎肝細(xì)胞;BNLCL.2品牌冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的小鼠胚胎肝細(xì)胞;BNLCL.2品牌報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細(xì)胞名稱 小鼠胚胎肝細(xì)胞;BNLCL.2品牌
形態(tài)特性
生長特性 貼壁生長
特征特性 在用*和苯*代替*和*的平板上選擇建立了這株細(xì)胞。檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(9+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
人腦血管平滑肌細(xì)胞英文名稱:HBVSMC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦血管外膜成纖維細(xì)胞英文名稱:HBVSMC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦血管周細(xì)胞英文名稱:HBVP*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:HCPEC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞英文名稱:HCPEpiC *規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞英文名稱:HCPF*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦膜細(xì)胞英文名稱:HMC*規(guī)格:5 x 10^374 cells/vial
Anti-phospho-c-Raf (Ser259)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原癌基因c-Raf抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Avidin 兔抗親和素Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
綠色熒光蛋白 Anti-GFP 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgG 0.1ml
FAAH2 英文名稱: 脂肪酸酰胺水解酶2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Smad2(Ser245/250/255) 磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Avidin 兔抗親和素Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
Anti-VEGFR1/VEGF-R1/Flt-1 /FITC 熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長因子受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CDK5(Cyclin Dependent Kinase 5) 周期素依賴性激酶5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體(人) Anti-CD46/MCP/membrane cofactor protein 0.1ml
phospho-SHC (Ser36) 英文名稱: 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
phospho-ERK1/2 (Thr202 + Tyr204) 英文名稱: 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-GluR1(Ser849) 磷酸化*受體1抗體 規(guī)格 0.1ml
CDK5(Cyclin Dependent Kinase 5) 周期素依賴性激酶5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD161/NK1.1 CD161抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAR4 蛋白酶活化受體4抗體 規(guī)格 0.1ml
LAMP3 Kit Human 人 CD208 / DC-LAMP / LAMP3 ELISA配對抗體 ELISA
TBRG1 英文名稱: 轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.2ml
CDK1 英文名稱: 周期素依賴性激酶1抗體 0.1ml
Anti-CD161/NK1.1 CD161抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-NKG2C/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞受體2C/自然殺傷細(xì)胞活化性受體2C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-HAS/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記人血清白蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
鈣激活鉀通道蛋白抗體 Anti-BKCa channels 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/APC APC標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml
Fibronectin 英文名稱: 纖維連接蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh PPIA/Cyclophilin A 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIA抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-HAS/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記人血清白蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
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