Fluo-4 的膜滲透 AM 酯形式，可通過孵育進入細胞。由于 AM 酯的水溶性相對較低，溫和的去污劑Pluronic® F-127（目錄號 59004）通常用作分散劑以促進細胞負載。Fluo-4, AM ester本身不與 Ca 2+結合，但一旦進入細胞內，它很容易被內源性酯酶水解成 Fluo-4。Fluo-4, AM ester通常用于在高通量藥物篩選中測量細胞內鈣。

Fluo-4 是 Fluo-3 的類似物，其中兩個氯取代基被氟取代，這導致 488 nm 處的熒光激發增加，從而產生更高的熒光信號。Fluo-4 在 494 nm 處具有最大吸收，因此可被氬離子激光激發。Fluo-4 在沒有 Ca 2+存在的情況下基本上是非熒光的，但在 Ca 2+結合時熒光增加至少 100 倍。此外，由于 Fluo-4 比 fura-2 和 indo-1 更弱地結合 Ca 2+（更高的 Kd），因此它對于測量Ca 2+尖峰期間的高瞬時 Ca 2+濃度更有用。

艾美捷Fluo-4, AM ester#50018可用于通過熒光顯微鏡、流式細胞術或熒光酶標儀檢測細胞內游離鈣。

基于 BAPTA 的離子指示劑（如 Fluo-4）已被EDC/EDAC（目錄號 59002）原位固定。指示染料的固定可用于下游免疫熒光和 IHC 研究 ( Cell Calcium 1997, 21(3), 175 )。

由于指示劑不與細胞成分共價結合，因此它可以通過有機陰離子轉運蛋白主動從細胞中流出。流出速率隨溫度增加，并且可能因細胞類型而異，導致保留時間從幾分鐘到幾小時不等。在細胞中使用指示劑的實驗通常在加載后一到兩個小時內進行，但如果需要，可以重新加載具有指示劑的細胞。有機陰離子轉運蛋白抑制劑丙-磺-舒 (#50027)可用于減緩指示劑從細胞中流出的速度。

Fluo-4, AM ester相關參數：

可溶于DMSO的橙紅色固體

-20°C 儲存并避光，尤其是在溶液中時

λ Ex /λ Em（含 Ca 2+）：494/506 nm（水解后）

緩沖液中 Ca 2+的K d：~335 nM（水解后）

C 51 H 50 F 2 N 2 O 23

分子量：1096.95

[273221-67-3]

Fluo-4, AM ester屬性：

細胞滲透性：透膜劑

激發/發射：494/516 nm（水解后）

指標類型 ：非比例

CAS號：273221-67-3