今天給大家介紹一款熒光法雙鏈DNA檢測工具—Pico488 dsDNA定量試劑盒(B1102),以及單獨的Pico488 dsDNA 定量試劑(42010),Pico488是一種極為靈敏的熒光核酸染料,常用于雙鏈DNA的定量檢測。歷來DNA濃度的測定在cDNA文庫的構建,DNA亞克隆、PCR產物的估測等領域中具有重要意義,疫苗等生物制品中殘留微量DNA的檢測更是直接關系到人類的健康。
Pico488僅在與DNA雙鏈結合后才發出熒光,且所產生的熒光與DNA濃度呈正比,在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下,可以選擇性地檢測低至pg級別的dsDNA。該分析在三個數量級范圍內呈線性,且幾乎無序列依賴性,可以精確地測量多個來源的DNA,包括基因組DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR擴增產物,可用熒光分光光度計或熒光酶標儀讀數,Ex/Em=503nm/525nm。
艾美捷B1102 Pico488-dsDNA定量試劑盒,用于在存在RNA、蛋白質和常見污染物的情況下定量測量樣品中的雙鏈DNA。Pico488允許對低至pg/mL的dsDNA進行定量。DNA濃度測量的線性范圍為1 pg/μL–5 ng/μL,因此該試劑盒的靈敏度可評定為超高(UHS)。
Pico488-dsDNA定量試劑盒包含用于測量的Pico488染料、緩沖液和DNA標準。它與熒光計、熒光板讀數器、反應杯和微量熒光計兼容。
相比傳統的方法,如紫外吸光法(A260)、探針雜交法、Hoechst 33258染料法等,Pico488 dsDNA 定量具有以下優勢:
①靈敏度高:數量級較UV吸光讀數更敏感,檢測范圍為:1pg/ul–5ng/ul,可節省寶貴的樣品;
②特異性強:在等摩爾的RNA存在的條件下,對dsDNA具有特異性;
③耐受性好:耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖,可以直接定量PCR擴增產物而無需從反應混合物中純化DNA;
④易于使用:只需在樣品中加入染料,等待5分鐘,然后讀數即可,且適用于24和96孔板;與市面上的大多數熒光酶標儀和熒光計兼容;
⑤適用范圍廣:可適用于PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活性分析、基因組DNA定量以及復雜混合物中dsDNA的檢測和病毒DNA定量等多種領域。
Pico488-dsDNA定量試劑盒引用文獻賞析:
1.Caza, F.; Granger Joly de Boissel, P.; Villemur, R.; Betoulle, S.; St-Pierre, Y. Liquid biopsies for omics-based analysis in sentinel mussels. PLoS One, 2019, 14(10), e0223525. doi: 10.1371/journal.pone.0223525
2.Crupi, A.N.; Nunnelee, J.S.; Taylor, D.J.; Thomas, A.; Vit, J.-P.; Riera, C.E.; Gottlieb, R.A.; Goodridge, H.S. Oxidative muscles have better mitochondrial homeostasis than glycolytic muscles throughout life and maintain mitochondrial function during aging. Aging, 2018, 10(11), 3327–3352. doi: 10.18632/aging.101643
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