喜-樹(shù)-堿是一種植物抗癌藥物，化學(xué)式為C20H16N2O4，淺黃色針狀結(jié)晶。從中國(guó)中南、西南分布的喜樹(shù)中提取得到。1976年中國(guó)化學(xué)家高怡生等合成消旋喜-樹(shù)-堿成功。喜-樹(shù)-堿對(duì)腸胃道和頭頸部癌等有較好的療效，但對(duì)少數(shù)病人有尿血的副作用。10-羥基喜-樹(shù)-堿的抗癌活性超過(guò)喜-樹(shù)-堿，對(duì)肝癌和頭頸部癌也有明顯療效 ，而且副作用較少。

化合物簡(jiǎn)介：

喜-樹(shù)-堿(Camptothecin，CPT)，是一種細(xì)胞毒性喹啉類(lèi)生物堿，能抑制DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶(TOPO I)。1966年由M.E. Wall和M.C. Wani 通過(guò)有系統(tǒng)的篩選天然物質(zhì)，進(jìn)而發(fā)現(xiàn)的抗癌藥物。

喜-樹(shù)-堿是從產(chǎn)于中國(guó)的喜樹(shù)(喜樹(shù)，幸福樹(shù))樹(shù)皮和枝干分離出來(lái)，早期為傳統(tǒng)中醫(yī)療法治療癌癥的方法。喜-樹(shù)-堿在初步臨床試驗(yàn)有顯著的抗癌特性、溶解度低以及含有高度的藥物不良反應(yīng)特性。藥用化學(xué)家進(jìn)而利用這些特性開(kāi)發(fā)出了多樣的合成喜-樹(shù)-堿和各種衍生品，以增加良好的效果。現(xiàn)今已有兩個(gè)喜-樹(shù)-堿的類(lèi)似物批準(zhǔn)，并為癌癥進(jìn)行化療，如拓?fù)涮婵岛鸵亮⑻婵怠?/span>

理化性質(zhì)：

淡黃色針狀結(jié)晶。熔點(diǎn)264～ 267℃，[α]D20+31.3°(氯-仿∶甲醇=1∶2)。不溶于水，溶于氯-仿、甲醇、乙醇中。其溶液在紫外光燈下顯紫藍(lán)色熒光，見(jiàn)光易變質(zhì)，微有吸濕性，遇濃硫酸顯黃綠色，用蒸餾水稀釋產(chǎn)生黃綠色熒光，呈堿性。與碘化鉍鉀反應(yīng)，生成橙紅色復(fù)鹽沉淀。由喜樹(shù)根或果粉以有機(jī)溶劑提取而得。毒性較大，提取時(shí)應(yīng)小心，有抗腫瘤活性。用以治療腸癌、直腸癌、胃癌和白血病等癥，10-羥基喜-樹(shù)-堿毒性較小。

艾美捷喜-樹(shù)-堿(Camptothecin)是一種強(qiáng)細(xì)胞毒性的五環(huán)生物堿，具有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的特性。喜-樹(shù)-堿及其類(lèi)似物可抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶I (topo I)，使S期細(xì)胞進(jìn)入凋亡。喜-樹(shù)-堿結(jié)合并穩(wěn)定拓?fù)?/span>I - DNA骨干復(fù)合體(共價(jià)二元復(fù)合體)。這種穩(wěn)定的復(fù)合物減少了從斷鏈釋放的topo I的速率，從而減緩了宗教和隨后的DNA合成過(guò)程。用喜-樹(shù)-堿在細(xì)胞凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中建立陽(yáng)性對(duì)照。

艾美捷喜-樹(shù)-堿(Camptothecin)協(xié)議：

1.將喜-樹(shù)-堿粉末溶解在組織培養(yǎng)級(jí)DMSO中，以獲得2mg/mL喜-樹(shù)-堿儲(chǔ)備濃度。

2.制備50–100µL的DMSO增溶喜-樹(shù)-堿等分試樣，并將其冷凍保存在<-20°C。一瓶冷凍的喜-樹(shù)-堿可在丟棄前再解凍2次。應(yīng)標(biāo)記已解凍1X的小瓶，以表明這一點(diǎn)，以便它們?cè)趤G棄前只經(jīng)過(guò)一次解凍。

3.喜-樹(shù)-堿濃度范圍為2–4µg/mL的刺突細(xì)胞培養(yǎng)物，產(chǎn)生6–12µM的細(xì)胞培養(yǎng)物喜-樹(shù)-堿濃度。該喜-樹(shù)-堿濃度范圍適用于誘導(dǎo)Jurkat或HL 60細(xì)胞懸浮液，其濃度范圍通常為1 x 105–1 x 106細(xì)胞/mL。在此濃度范圍內(nèi)，培養(yǎng)4小時(shí)（37°C）后成功誘導(dǎo)凋亡。

4.對(duì)特定細(xì)胞系進(jìn)行時(shí)間歷程研究，以確定合適的喜-樹(shù)-堿濃度和暴露時(shí)間，從而為實(shí)驗(yàn)實(shí)現(xiàn)良好的凋亡誘導(dǎo)水平。

5.繼續(xù)實(shí)驗(yàn)性凋亡誘導(dǎo)模型系統(tǒng)。

以上，就是有關(guān)艾美捷喜-樹(shù)-堿(Camptothecin)的相關(guān)介紹。