ImmunoChemistry艾美捷黑色素是一種有效的微生物毒素,它作為鉀離子載體,導致細胞內鉀水平的凈降低。這對于NLRP3炎癥小體的寡聚化和焦下垂中caspase-1的激活至關重要。Nigericin可作為焦下垂實驗中的陽性對照。
炎癥性半胱天冬酶,如caspase-1,在觸發裂解性程序性細胞死亡(稱為焦下垂)的機制中起著關鍵作用。
ImmunoChemistry艾美捷黑色素可作為焦下垂實驗中的陽性對照。黑曲霉素是一種從吸水鏈霉菌中提取的有效微生物毒素。它作為鉀離子載體,誘導細胞內鉀水平的凈降低,這對于NLRP3炎癥小體的寡聚化和caspase-1的激活至關重要。它需要通過泛-1發出信號,以誘導caspase-1的活化和IL-1?的加工和釋放。已經表明,它在包括Jurkat和THP-I細胞在內的各種細胞系中產生了強大的caspase-1激活反應。。
ImmunoChemistry艾美捷黑色素組分:
用100µL DMSO重新配制每小瓶尼格瑞金,形成5mM儲備濃縮液。一旦重組,可等分并儲存在≤ -20°C,避光1年,在此期間解凍不超過兩次。
在加入樣品和對照品之前,立即在diH2O中以1:10的比例稀釋5mM Nigericin原液,形成500µM工作溶液,用于處理樣品。例如,通過向180µL diH2O中添加20µL儲備濃縮液來稀釋1:10。
使用1-20µM的Nigericin在細胞中誘導NLRP3炎癥小體激活。例如,要在10µM下使用,將500µM工作溶液稀釋至1:50;e、 g.用6µL 500µM工作溶液加標294µL細胞懸浮液/覆蓋培養基。37°C時的典型處理時間為3-24小時。每個研究者應調整尼格瑞林的濃度和治療期,以適應特定的細胞系和研究條件。
NLRP3炎癥小體活化可通過ELISA或Western blot檢測分泌的促炎細胞因子IL-1β或IL-18,或通過使用caspase-1活化測定法,如ICT的caspase-1測定試劑盒或Pyroposis/caspase-1檢測試劑盒來檢測。
ImmunoChemistry Technologies簡稱"ICT",提供各種細胞蛋白酶、細胞凋亡與細胞毒性檢測試劑盒等研究工具,同時包含高質量高靈敏度的 ELISA開發試劑。艾美捷科技是ImmunoChemistry的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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